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脑出血是指非外伤性脑实质内部血管破裂引发的脑内出血病症,占全部脑卒中的20%~30%,急性期病死率为30%~40%。羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)是他汀类药物发挥抑制作用的直接作用点,HMGCR功能被抑制会影响血管的完整性和稳定性,诱发脑出血。由于斑马鱼大脑具有典型脊椎动物脑部形态学特征,血管与神经系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85%以上。在大量摄入辛伐他汀后,斑马鱼脑部也会出现脑出血的情况,患有脑出血的斑马鱼的脑部会出现明显的片状出血,而正常斑马鱼没有;由于脑出血斑马鱼的心搏输出量和血流速度也会降低,利用血流分析仪可明显观察到。脑出血可直接造成反应迟钝、运动功能障碍,可通过行为分析软件观察斑马鱼的行为轨迹。我们评价斑马鱼脑出血有4个指标:1.脑出血发生率;2.心搏输出量;3.血流速度;4.行为学(运动改善)。利用斑马鱼模型评价抗PM2.5功效。药理实验造模

药理实验造模,药物

斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼肝脏中有许多与哺乳动物同源的脂质代谢酶,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。而且斑马鱼幼鱼通体透明,容易观察到毒性表型。酒精性肝损伤是全世界发病率和死亡率的主要原因,酒精性肝损伤是过量饮酒的结果。当患者继续饮酒时,会诱发严重的肝损伤形式,如脂肪性肝炎,纤维化,肝硬化和肝细胞。用乙醇可以诱发斑马鱼肝脏损伤,模拟人的肝脏疾病。我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3.卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4.肝脏病理切片。药效检测费用利用斑马鱼模型评价抗焦虑功效。

药理实验造模,药物

斑马鱼消化道的解剖结构和细胞结构与人类消化道相似,具有同心圆层的内上皮、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。三硝基苯磺酸(TNBS)的乙醇溶液造模法属于正常免疫系统下的半抗原诱导性模型,当TNBS的乙醇溶液灌肠时,乙醇作为有机溶剂溶解肠粘膜表面的黏液,暂时性破坏肠粘膜屏障,使TNBS和肠组织蛋白结合形成完全抗原,导致肠黏膜免疫系统针对该抗原的迟发性变化反应,并造成肠黏膜的损伤。杯状细胞是黏蛋白的主要来源,其数量和形态反应肠粘膜的健康状况,是肠粘膜异常的敏感指标。由于斑马鱼通体透明的特点,有两种方法检测结肠炎的防治作用。1.观察肠腔面积的变化,2.通过特异性染料(呈蓝色)对肠道的杯状细胞染色,通过观察杯状细胞数量来判断肠粘膜的损伤情况。

糖尿病是一种由遗传基因决定的与肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为肯定或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的***系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续血糖高现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼血糖高,模拟人的二型糖尿病。用血糖仪对高糖高脂斑马鱼进行血糖检测。斑马鱼模型评价眼毒性。

药理实验造模,药物

蛋黄粉中60%为脂类,用蛋黄粉喂食斑马鱼,可以使斑马鱼血液中的脂肪含量快速升高,从而建立斑马鱼血脂高症模型。经过油红O特异性脂肪染色(与组织内甘油三酯等脂肪滴结合呈橘红色),血脂高斑马鱼血管内肉眼可见明显的脂质聚积,通过静脉注射,可见荧光标记胆固醇的积累。我们评价斑马鱼降低血脂功效有4个指标:1.斑马鱼血脂表型图;2.斑马鱼总甘油三脂含量;3.斑马鱼胆固醇表型图;4.斑马鱼总胆固醇含量。1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用降脂产品组的血脂聚积情况与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀类降脂产品具有明显的降脂降胆固醇作用。斑马鱼模型实验评价细胞凋亡。中药验证实验

利用斑马鱼模型评价酒精性肝损伤保护作用。药理实验造模

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和抗结肠炎药物组。其中正常对照组未摄入TNBS,模型对照组与抗结肠炎药物组都加入了等量的TNBS(TNBS通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。抗结肠炎药物组在摄入TNBS的同时摄入泼尼松之类抗结肠炎药物。服用一段时间抗结肠炎药物组后,我们观察斑马鱼的肠腔面积变化、杯状细胞数量。可以看到,服用抗结肠炎药物的肠腔面积与未加TNBS的正常对照组比较相似,没有明显的肠腔面积扩大。药理实验造模

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