细胞水平的功能性检测是药物筛选和生物学研究的基础。均相化学发光为此提供了多种稳健的检测方案。比较经典的是基于ATP含量的细胞活力/增殖/毒性检测。活细胞内的ATP与荧光素酶-荧光素反应直接偶联,产生化学发光信号,其强度与活细胞数成正比。该方法操作简单(一步加样裂解/检测),灵敏度高,线性范围宽。此外,针对细胞凋亡,可通过检测Caspase酶活性(使用化学发光的Caspase底物)或膜磷脂酰丝氨酸外露(使用与化学发光检测偶联的Annexin V类似物)来进行均相分析。这些方法均实现了在微孔板中对细胞状态的快速、定量评估。降本增效新方案,为您节省实验成本!吉林浦光生物均相发光应用领域
适配体是通过体外筛选得到的单链DNA/RNA分子,能特异性结合小分子、蛋白质甚至细胞。将适配体的高特异性与均相化学发光的高灵敏度结合,催生了新型生物传感器。设计策略包括:构象开关型:适配体与化学发光标记物(如吖啶酯)和淬灭基团相连,结合靶标后构象变化,改变发光效率。分裂型:将化学发光酶或催化其反应的组分分割,分别与分裂的适配体序列连接,靶标存在时适配体重组,恢复发光活性。邻近连接型:两个适配体分别结合靶标的不同部位,拉近其携带的化学发光反应组分(如供体/受体珠),触发信号。这些传感器在环境监测、食品安全和生物标志物检测中潜力巨大。上海浦光生物均相发光免疫分析均相化学发光在 POCT(即时检验)领域的应用现状?
组蛋白修饰酶(如甲基转移酶、去甲基酶、乙酰转移酶、去乙酰化酶)是**、神经疾病等领域的热门靶点。均相化学发光技术为这些酶活性的检测和抑制剂筛选建立了成熟平台。以组蛋白甲基转移酶为例,通常使用生物素标记的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)类似物作为甲基供体。酶反应后,生物素标记的甲基被转移到组蛋白底物上。然后,使用针对甲基化位点的抗体(偶联供体珠)和链霉亲和素(偶联受体珠)通过Alpha技术检测,信号强度与酶活性成正比。这种方法灵敏度高,抗干扰能力强,可直接在含有化合物和辅因子的混合体系中进行筛选。
自身免疫病的诊断常依赖于检测患者血清中的特异性自身抗体。均相化学发光技术为此提供了高通量、自动化的解决方案。例如,可以将已知的自身抗原(如dsDNA、ENA蛋白)包被在供体微珠上,患者血清中的自身抗体如果存在,则会与抗原结合。然后加入标记有受体(如荧光标记的抗人IgG抗体)的受体微珠或试剂,形成“抗原-自身抗体-抗人IgG”复合物,从而拉近供受体产生信号。这种方法可以实现多种自身抗体的同步检测,快速辅助临床诊断。均相化学发光与电化学发光相比,有什么不同?
在药物安全性评价早期,评估化合物的遗传毒性至关重要。传统的细菌回复突变试验(Ames试验)周期较长。一些基于哺乳动物细胞的均相化学发光遗传毒性筛选方法被开发出来。例如,使用工程细胞系,其中DNA损伤响应元件(如p53响应元件)调控着荧光素酶报告基因的表达。当化合物引起DNA损伤时,会活化报告基因,产生化学发光信号。这类方法能在几天内完成对大量化合物的初步遗传毒性风险评估,作为Ames试验的高通量预筛选工具,有助于早期淘汰有风险的候选分子,节约研发成本。浦光生物冻干试剂,灵敏度高,特异性强,实验结果更可靠!北京均相发光临床检验医学中的应用研究
均相化学发光在自身免疫性疾病诊断中的作用大吗?吉林浦光生物均相发光应用领域
离子通道和转运体是重要的药物靶点,但传统电生理方法通量极低。基于化学发光的离子敏炎症料或蛋白,为高通量筛选提供了可能。例如,使用对钙离子敏感的水母发光蛋白(Aequorin)或基于荧光素酶的钙指示剂(如Photina)。当离子通道开放引起离子内流时,会触发这些蛋白的化学发光反应。将稳定表达该报告系统和目标离子通道的细胞系用于筛选,加入化合物后直接测量发光信号变化,即可高通量地发现通道的激动剂或阻断剂。类似原理也可用于钠、钾等离子通道或某些转运体的功能研究。吉林浦光生物均相发光应用领域