鲎试剂检测法 凝胶法 原理:鲎试剂含有能与内素(主要的热源物质)反应的凝固酶原和凝固蛋白原。当含有内素的样品与鲎试剂接触时,内素会凝固酶原,使其转化为凝固酶,凝固酶进一步作用于凝固蛋白原,使溶液形成凝胶。如果没有凝胶形成,可能表示热源物质已被去除。 操作步骤:将鲎试剂按照说明书要求用无热原的水复溶。取适量的处理后的纯水样品与复溶后的鲎试剂混合,放入小试管中,在 37℃恒温箱中孵育 60 - 90 分钟。观察溶液状态,如果溶液仍然为液体,没有形成凝胶,初步判定样品中内素含量低于检测限,可能热源物质已被有效去除;若形成凝胶,则说明仍含有内素,热源物质未完全去除。对于色谱分析实验,去离子水可减少基线波动与杂质峰。江苏去离子水发展
高温法 原理:基于热源物质的耐热性特点,通过高温加热使热源物质的结构发生改变或分解,从而失去致热活性。一般情况下,需要在较高的温度和较长的时间条件下才能有效破坏热源. 操作要点:对于液体水,通常采用高温蒸汽灭菌等方式,但要注意在加热过程中防止水的大量蒸发和容器的耐压问题。对于固体物质或设备表面的热源去除,可以采用干热灭菌等方法,但要确保加热温度和时间能够达到彻底破坏热源的要求。 酸碱处理法 原理:利用强酸或强碱溶液与热源物质发生化学反应,改变其化学结构和性质,使其失去致热活性。例如,强碱可以使热源物质中的脂多糖等成分发生水解反应. 操作要点:在使用酸碱处理时,要严格控制酸碱的浓度、处理时间和温度等参数。处理后,需要对水进行中和处理,使其达到合适的 pH 值范围,并且要经过充分的清洗或后续处理,以去除残留的酸碱物质和反应产物。附近去离子水去离子水在生物技术的蛋白质纯化过程中,可提高纯化效率。
去离子水在制备过程中几乎去除了所有的矿物质离子,如钙、镁、钾、钠等。这些矿物质对人体健康是非常重要的。例如,钙是维持骨骼和牙齿健康的关键成分,人体约 99% 的钙存在于骨骼和牙齿中,它还在神经传导、肌肉收缩等生理过程中发挥重要作用;镁参与人体内多种酶的反应,对能量代谢、蛋白质合成等过程不可或缺。长期饮用去离子水会导致人体缺乏这些必需的矿物质,从而可能引发一系列健康问题。人体的内环境是一个复杂的平衡系统,其中电解质平衡尤为重要。长期饮用去离子水可能会破坏人体的电解质平衡。正常情况下,人体细胞内外的离子浓度是相对稳定的,如细胞外液中的钠离子对于维持细胞的正常渗透压和水分平衡至关重要。当长期饮用去离子水时,由于水中缺乏这些离子,人体可能会出现电解质紊乱的情况。这可能表现为疲劳、肌肉痉挛、心律失常等症状,严重时甚至会危及生命。
动态显色法 原理:在鲎试剂中加入了特殊的显色底物,当内素与鲎试剂反应时,的酶会作用于显色底物,使其产生颜色变化。通过检测颜色变化的程度(一般是在特定波长下检测吸光度)来定量测定内素的含量,吸光度与内素浓度在一定范围内呈线性关系。 操作步骤:先将含显色底物的鲎试剂复溶,然后将处理后的纯水样品与复溶后的试剂混合,放入到有比色功能的检测仪器(如酶标仪)对应的容器中。在恒温 37℃条件下反应一段时间后,在特定波长(如 405 - 410nm)下检测吸光度,然后根据标准曲线计算内素含量。若内素含量为零或低于标准要求,可判定热源物质已被去除。去离子水在制药行业的注射用水制备中有重要的前置处理作用。
动态显色法 原理:在鲎试剂中加入了特殊的显色底物,当内素与鲎试剂反应时,反应的酶会作用于显色底物,使其产生颜色变化。通过检测颜色变化的程度(一般是在特定波长下检测吸光度)来定量测定内素的含量,吸光度与内素浓度在一定范围内呈线性关系。 操作步骤: 先将鲎试剂(含显色底物)复溶,使用无热原的水按照说明进行操作。 将纯水样品与复溶后的试剂混合,放入到有比色功能的检测仪器(如酶标仪)对应的容器中。 在恒温条件下(通常为 37℃)反应一段时间后,在特定波长(如 405 - 410nm)下检测吸光度,然后根据标准曲线计算内素含量。 适用范围和局限性:动态显色法的灵敏度与动态浊度法相当,也具有较高的灵敏度,能够定量检测内素。它的优点是可以使用普通的酶标仪进行检测,设备相对较为普及。不过,它也容易受到样品颜色和其他可能干扰吸光度检测的因素的影响,并且需要准确的标准曲线来确保检测结果的准确性。在制药行业的栓剂生产中,去离子水可优化栓剂的成型性。通用去离子水零售价
去离子水的折射率相对稳定,利于光学相关实验与测量。江苏去离子水发展
检查微生物限度 原理:微生物是热源物质的主要来源之一,如细菌内素就是革兰氏阴性菌细胞壁的成分。如果纯水中微生物数量得到有效控制,在很大程度上可以推断热源物质也被有效去除。 操作步骤:可以采用平板计数法检测水中的细菌总数。将一定量(如 1mL)的处理后的纯水样品接种到营养琼脂培养基平板上,在适宜的温度(如 37℃)下培养 24 - 48 小时后,计数平板上生长的菌落数。如果菌落数低于规定的限度(如饮用水标准中细菌总数每毫升不超过 100CFU),说明微生物得到有效控制,热源物质可能已被去除。同时,也可以采用滤膜法,将一定量的纯水通过滤膜,然后将滤膜放在培养基上培养,计数滤膜上的菌落数来检测微生物数量。江苏去离子水发展
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