使用氨丁三醇缓冲体系可提高mRNA稳定性
近日，Moderna公司举办了第五届科学和技术日）活动。在报告中，该公司介绍了在改良mRNA疗法递送和稳定性方面的***进展。mRNA本身具有不稳定性，因此提高mRNA的稳定性在延长药物存储时间和保质期方面具有非常现实的意义。Moderna公司的研究人员在研究中发现，LNP配方中的可电离脂质的叔胺氮可以与mRNA产生化学反应，生成加合物。这种加合物会导致mRNA无法被翻译，从而降低mRNA编码的蛋白的表达。由于这种成份在多种包含可电离脂质的LNP配方中存在，这一降低mRNA表达能力的机制可能在业界***使用的LNP产品中存在。
该公司的研究指出，在携带mRNA的LNP生产过程中，需要使用不同手段降低加合物的生成，这可能带来多种益处，包括改善产品保质期，让产品能够在更高的温度下储存，并且维持产品的活性和制造批次之间的一致性。比如，Moderna指出使用Tris氨丁三醇缓冲液可以减少加合物的生成，允许mRNA产品在2-8℃环境下的长期储存。 艾伟拓药用级氨丁三醇怎么购买！浙江尼松针酮咯酸氨丁三醇
氨丁三醇作为甲醛清除剂，已有较为广泛的应用，且不限于生物医药领域。例如，国外有报道的**将氨丁三醇作为一种新型除醛剂应用在水泥砂浆或乳胶漆中，其报道的氨丁三醇去除甲醛的反应机理为：氨丁三醇与甲醛按1∶2物质的量比进行反应，该反应为可逆反应，反应**终产物为恶唑烷。
由于可电离脂质在LNP结构及功能上的重要性，短时间内很难将其替换。因此，为提高mRNA分子的稳定性，降低mRNA-LNP疫苗储存要求，延长其有效期，选择氨丁三醇缓冲液同时发挥pH调节剂与醛基清除剂的作用是一个值得尝试的方向。此外，参考已上市脂质体药物制剂***，通过添加抗氧化剂减少LNP制剂中可电离脂质的氧化，从而减少醛基的产生，或许也是一个值得借鉴的选项，如两性霉素B脂质体Ambisome®***中的α-生育酚等。
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使用该方法配置Tris/Tris-HCl缓冲液的注意事项如下：①浓度及温度对Tris缓冲液pH均有较大影响，建议做上述实验时，保持与实际使用场景相同的温度与浓度，并在配置完成后***时间进行测量，避免二氧化碳的干扰。②若变更使用浓度或环境温度，需重新进行上述实验。③为避免Tris-HCl含量波动等因素造成配置的缓冲液pH不稳定，建议采购质量可靠的药用级Tris及Tris-HCl产品。
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缓冲液的作用
缓冲液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值，使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围，例如，苯酚在碱性介质及铁**钾存在下，可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，为了防止芳香胺类的干扰，以pH在10士0.2时**为适宜。为此，就需要在待测溶液中加入缓冲液，调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。在实际工作中，有些分析人员由于不大了解缓冲液的作用机理，当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时，为使缓冲溶液达到要求，就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值，然而，结果却适得其反，这样的溶液pH值虽然调对了，可是它的缓冲体系却被破坏了，也就失去了缓冲的作用。
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生物制剂领域常用缓冲液
生物制剂领域常用的缓冲液主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。（1）硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。（2）柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。（3）磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
氨丁三醇（Tris）是一种广泛应用于生物医药领域的缓冲盐，化学式C4H11NO3，白色结晶颗粒，常用于蛋白或核酸缓冲液，有效范围通常是pH7.0-9.2之间。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长，Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一，其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的pH。此外Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物，Tris也被用作滴定标准物。 浙江尼松针酮咯酸氨丁三醇
