疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5%脱脂奶粉(NFDM)的Tris缓冲盐水含0.1%Tweeno 20表面活性剂(TBST),并用一级抗B-Tubulin进行探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道,抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注:请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架,并用中性清洁剂洗涤,然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架,请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方采购细胞跨膜电阻仪哪家靠谱?虹口区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器联系电话
P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印迹框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗体量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗涤缓冲液*量每孔4x 15 mL每个4x 30 mL每个4x 30 mL●Tris或磷酸盐缓冲盐溶液,补充有0.1%Tweene 20表面活性剂在计算免疫检测所需的抗体量时,三个要素对于成功检测出蛋白质并获得了高质量的印迹(低背景,高信号):●样品类型和凝胶上样浓度●一级和二级抗体浓度●检测试剂的种类和灵敏度下表中的所有抗体均使用LuminataTM Forte化学发光检测试剂进行了测试。对于SNAP i.d. @ 2.0系统,抗体浓度高于标准免疫检测中的浓度,但浓度较低体积。 表3.标准免疫检测中一抗稀释的实例 SNAPi.d.®2.0免疫检嘉定区Merck细胞计数器Merck仪器代理价格上海益启生物的样本制备仪询价公司电话。
项卡(图8)创建和启动自定义协议。要手动控制流量,使用“手动模式”标签选择所需的井,压力,和温度(如果使用加热歧管)。有关自动化协议或每次融合的手册,请参阅CellASICO《ONIX2微流体系统用户指南》。注意:对于需要快速交换溶液的实验,请执行以下操作可以应用以下技术:高压(55.2kPa[8psi)下的流量对于初始过渡,然后将流量减小到标准压力长期暴露于6.9-13.8kPa(1-2psi)。 软件操作下图显示了使用ellAsICEONX2软件进行实验的两种模式,请参阅CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用户有关软件功能的详细信息的指南。图7.手动模式降低了ONIX2系统的迭代操作。可以手动设置操作参数,此模式a5o提供了选项运行简短的自动印版设置序列,这些序列
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2.0系统计算SNAP i.d.9 2.0系统所需的抗体浓度用于标准免疫检测的浓度标准SNAP i.d.o 2.0免疫检测免疫检测多印迹迷你印迹Midi污点_Ab浓度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗体量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗体量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比较终抗体稀释1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗体库存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每种抗体都是只有一个的,并且检测试剂的灵敏度各不相同,因此可能有必要进行调整抗体或抗原浓度,使用的检测试剂的类型或灵敏度或印迹X射线曝光时间。请注意,本指南只作为开发比较终抗体的起点浓度以获得所需的性能。表2.封闭,抗体和洗涤的建议体积SNAP i.d.o 2.0SNA虹口区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器联系电话
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