问题 可能的原因 处理方法 印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。 印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。 采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。 印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形 采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。 印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。 否正确上海H3抗体哪家靠谱？静安区MYC抗体抗体代理价
对于成功的ChIP实验，选择适当的ChIP抗体是**关键的步骤之一。即使是比较高质量的抗体，即在经典的Western blot验证中表现非常好的抗体，也不一定适合ChIP。比较好只考虑使用在ChIP实验中专门验证过的抗体。一般的， ChIP实验之后会用定量PCR（qPCR）来验证某一特定DNA序列是否与靶蛋白有关。研究人员可以采用这种经典方法评估目标蛋白与已知的靶基因之间的相互作用。 ChIP实验可以细分为以下几个主要步骤： 样品制备 蛋白与DNA交联 细胞裂解和染色质片段化 染色质免疫沉淀静安区MYC抗体抗体代理价WB抗体的报价具体是多少呢?
对您的特定应用，增加（和优化）试剂浓度和培养时间。 检查确保检测试剂按建议的方法正确贮藏和使用。 从抗体缓冲液中除去吐温。 配制少量工作液（1mL），在暗室中加入HRP偶联二抗1mL。 应观察到可见的蓝光。 在再杂交过程中可能有抗原损失。 信号较弱 在凝胶上的蛋白不足 在凝胶上载入更多的蛋白，或在载入之前浓缩样品，或使用免疫沉淀以增加在凝胶运行的中靶蛋白量。 使膜曝光时间延长（1-2小时）。 转移到膜上的蛋白过少--优化转膜条件，如转膜缓冲液pH、膜类型和电压等。
在阴性对照（igG或mockIP）样品中本底较高 抗体过量导致抗体与非靶蛋白结合∶ 与珠子的非特异性结合∶ 染色质的不完金裂解∶ 试剂污染∶ "无DNA" PCR反应显示信号 DNA的较低回收率 ChIP抗体无效或较低亲和力： ChIP抗体不足： 起始样品不足： 细胞不完全溶解和无效裂解： 交联过度： 交联不足： 亲和力较低或珠子质量较差： PCR引物： 优化抗体的浓度。 加入-个残***步理，以除这些非特异性蛋白或添加珠子的阻断剂。 优化取解过程，以民得介于200-100bp长度的染色质。神经抗体的报价具体是多少呢?
如果实验试剂将用于进一步测量，应避免直接使用移液管从试剂瓶中移取。（氧化活性污采物可通过非特异性显色影响费底物），检查所用抗体和陶结合物的实验验稀释度 检查确保样品根据建议的样品操作抽提、配制和贮菱（聚丙烯试管，澄清样品的贮载温度为-20℃）。配置样品和标准 品时究分程匀检查您的移液器，必要时进行校准。在每次移液器移取后更换移液器吸头。加样后，充分震荡微孔板，使试剂混匀 检查自动微孔板洗板机能正常工作;在每个洗涤步骤后，必须完全除去残留液体。组蛋白抗体的报价具体是多少呢?松江区Sigma抗体抗体报价
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除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。 蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。 关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。 酶联免疫吸附实验（ELISA）静安区MYC抗体抗体代理价
