膜的吸附损失
对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外
要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损
失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再
生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管
等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的
吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就
应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选
用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列
离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向
流系统,支持您获得理想的处理效果。 益启生物公司的 超滤浓缩管种类繁多。奉贤区离心浓缩管联系电话
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过
程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可
以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。
实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。
pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI
值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。
污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会
在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。 静安区默克超滤浓缩管代理价格超滤浓缩管的系列有很多。
提供的超滤管是没有经过去内***处理的,同时由于内***通常以多聚体的形式存在,大小
在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q®水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内***。关于针对Amicon®,Microcon® , Centricon®尝试过的内***去除方案。
Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附比较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计
一经推出即成为生物样品操作的行业**产品。不论是蛋白、
核酸、***或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品,
Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准
化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻
松。
Amicon® Ultra 超滤管的独特优点:
有效浓缩同时保证比较高的蛋白回收率
合理的死体积设计
•避免样品离干而降低回收率
•便于估计和控制样品浓缩倍数
•重复性好,便于样品数据相互比较 超滤浓缩管批发价格是多少呢。
截留
截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近
的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强
度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然”
分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下
会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择
合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择
为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。 超滤浓缩管直销公司。虹口区默克0.5ml超滤浓缩管订购
超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。奉贤区离心浓缩管联系电话
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。
7. 4,000×g离心15 min。
8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
用Protein A或G对抗体进行亲和纯化 奉贤区离心浓缩管联系电话
上海益启生物科技有限公司办公设施齐全,办公环境优越,为员工打造良好的办公环境。专业的团队大多数员工都有多年工作经验,熟悉行业专业知识技能,致力于发展默克密理博,默克, 密理博, 西格玛 ,安倍, 罗氏, 普兰德 的品牌。我公司拥有强大的技术实力,多年来一直专注于 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。的发展和创新,打造高指标产品和服务。上海益启生物科技有限公司主营业务涵盖试剂,耗材,科研试剂,仪器设备,坚持“质量保证、良好服务、顾客满意”的质量方针,赢得广大客户的支持和信赖。