膜的吸附损失
对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外
要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损
失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel® 再
生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小，是 Amicon® Ultra 超滤管
等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的
吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就
应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选
用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列
离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向
流系统，支持您获得理想的处理效果。 根据您的具体需求选择不同的 超滤浓缩管设计。闵行区离心浓缩管代理商
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。
有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。
研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。
样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 金山区超滤浓缩管参数上海超滤浓缩管代理销售电话多少？
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。
Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作
6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 上海 超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。
外泌小体（Exosome）是一种囊泡结构，直径通常在30-150nm，常见于正常体液和病理样本，培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体，其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流，影响和调控着多方面的生理功能，包括**的发生、免疫促进、凋亡调控、血管的生成、炎症的反应及发育和分化等。由于在体液中出现，外泌小体对于临床生物标志物检测来说特别有利，成为体外诊断、biomarker研究的新热点。 超滤浓缩管的好处有很多。常州默克超滤浓缩管订购
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Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而精细，蛋白吸附损失基本上大概小。
如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？
按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。
Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的，但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。
Amicon® Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。
不保证超滤管不包含RNA酶，建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。 闵行区离心浓缩管代理商
上海益启生物科技有限公司坐落在漕宝路400号明申商务广场907、908，是一家专业的 从事生物科技（除生物试剂）领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让；室内外装潢；建筑工程设计与施工；展览展示服务；计算机及配件、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品）实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。公司。目前我公司在职员工以90后为主，是一个有活力有能力有创新精神的团队。诚实、守信是对企业的经营要求，也是我们做人的基本准则。公司致力于打造***的试剂，耗材，科研试剂，仪器设备。公司力求给客户提供全数良好服务，我们相信诚实正直、开拓进取地为公司发展做正确的事情，将为公司和个人带来共同的利益和进步。经过几年的发展，已成为试剂，耗材，科研试剂，仪器设备行业出名企业。
