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口腔拭子采集介绍口腔拭子采集的意义口腔拭子采集的原理口腔拭子采集的流程为了更好的开展造血干细胞志愿者入库工作，减少志愿者在捐献过程中的疼痛感，今年中国红十字会开展了无创的口腔黏膜细胞HLA分型入库试点工作。口腔基低层增生的上皮细胞不断向浅层移动，成为功能项，行驶功能并补充定期脱落细胞表层细胞。采样拭子共4只，分别对应口腔的左上，左下，右上，右下四个部位。采集位置：口腔内侧，侧壁，口腔内壁与牙龈的交汇处。采集口腔黏膜细胞前的半个小时内，请尽量不要饮用含有***的饮品，含有碳酸的饮料或者果汁，如咖啡，茶，可乐等。打开包装口腔拭子的包装，先做吞咽动作，之后将拭子伸进口腔，紧靠右侧脸颊内侧来回刮拭15次，取出拭子，并在拭子棒手持部位贴上条形码。自然晾干半小时。Huachenyang(Shenzhen)TechnologyCoLtd，华晨阳主要制造：植绒拭子，咽拭子，口腔拭子，唾液采集器。尼龙采样拭子由手柄、连接杆和采样头三部分构成。长的手柄方便拿握，握的同时可前后调整，适合不同人群。
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使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞，加入去污剂，如sds等，除去膜脂。去除细胞内的蛋白质，包括与DNA结合的组蛋白，通过加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚／氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA，如实验不严密，可省略此步。沉淀DNA，需在冷乙醇或异丙醇中沉淀，放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法：基本同1法，*用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）五.表面活性剂快速制备法：用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。七.碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和。四川海绵植绒拭子厂家
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