猪流行性腹泻病毒PCR诊断试剂价目表

实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）技术凭借其高灵敏度、高特异性及与高通量检测平台的良好兼容性，已成为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）检测的**方法（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。通过构建已知浓度PRRSV核酸模板的标准曲线，该技术可实现病毒载量的***定量（即基因组拷贝数测定）（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。通用筛查型PRRSV RT-PCR引物通常靶向病毒基因组高度保守区域，以覆盖遗传多样性***的各类分离株（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。目前多种实时RT-PCR检测体系已被建立，例如八方同创研发的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光PCR检测试剂盒可同步鉴别PRRSV-1与PRRSV-2，但不同商业化试剂盒的诊断效能仍存在差异（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。针对特定疫苗株的检测方法亦有报道（Rawal et al., 2022, 2023; Yang et al., 2017），但临床应用尚有限。八方同创建议：检测时应结合样本类型与目的，选用经验证的检测体系，并规范操作流程以保障结果可靠性。 八方同创提醒猪场非洲猪瘟弱毒株阳性场猪只间歇性排毒明显，排毒量小，母猪群体环境不易检出。猪流行性腹泻病毒PCR诊断试剂价目表

虽然非洲猪瘟病毒抗体检测不是无疫地区早期检测的首道防线，但在未使用疫苗的情况下，非洲猪瘟病毒的血清学诊断在监测中起着重要作用。特别是，非洲猪瘟病毒抗体的早期出现和随后持续存在使其可用于检测亚急性和不明显疾病。也就是说，抗体可与病毒或病毒基因组同时循环数月(PJWilkinson1984)，并且在Infection暴露后无非洲猪瘟病毒的情况下,抗体仍可检测到数年。抗体检测对于监测从亚急性或无明显非洲猪瘟病毒中康复的猪尤为重要；在这种情况下，动物通常具有高水平的非洲猪瘟病毒特异性抗体。

因此，八方同创建议，爆发非洲猪瘟弱毒株的猪场，需要依靠两次抗体检测，淘汰抗体阳性猪后才能恢复生产。 虾十足目虹彩病毒诊断试剂准确率如何八方同创提醒猪场检测中阴性质控品不成立，样品频繁出现假阳性，可能是实验室污染所致。

八方同创提醒猪场实验室，猪场实验室也会偶发失控事宜，失控的处理方法如下：1、对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂进行大面积处理，包括：地板、墙面、天花板、门、窗户等地方，同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；2、对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂或75%酒精棉进行反复处理；对超净台等含有空气过滤系统的设备，请更换过滤网；对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂或75%酒精棉进行擦拭清洗，高温灭菌；3、待污染区域及设备器件清理完成后，使用紫外灯辐照4小时以上；4、设计实验对照组进行阴阳对照实验，根据阴性对照确认污染情况，可采用8连排PCR管（2个阳参+6个阴参）；若阳参起跳，阴参起跳，则污染需要继续清理；若阳参起跳，阴参全部不起跳了，则说明污染等到控制，可恢复正常实验；或者每隔一天采样检测，直至实验室环境监测阴性，可恢复正常实验，重新提取样本核酸检测。

八方同创提醒猪场实验室，实验室需要有质控品，质控品的概念和作用，质控品是指用于体外诊断的质量控制物质（定值和非定值），其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变化检测系统可能产生的分析偏差等性能特征。质量控制物质可用于能力验证、实验室内质量控制。质控品是各实验室日常工作中必不可少的重要组成部分，客观真实的反映整个检测过程的可靠性、准确性。使用阳性质控品不但可检测扩增反应液的质量，还可获得检测试剂的检测的下限信息；阴性质控品主要目的是监测污染，包括实验室以前的扩增产物的污染、有实验操作所致的标本之间的交叉污染、扩增反应试剂的污染等。八方同创的非洲猪瘟冻干微球试剂盒性能灵敏度、检出率、稳定性和便捷性等性能方面均优于液体试剂。

八方同创提醒猪场，非洲猪瘟抗体检测的作用是，1、为种猪引进提供参考依据，避免引入耐过猪、无症状猪或者抗体阳性猪。2、发现抗体阳性耐过猪，根据结果对猪进行分群管理。3、对后备母猪进行检测，在筛选后备母猪时避免阳性母猪进入后备舍。4、猪场进行非洲猪瘟净化一定要结合抗体监测，保证抗原抗体双阴。

非洲猪瘟抗体检测P72/P54/P30等的含义是：ASFV为二十面体对称，具有囊膜的双链DNA病毒，大小为170~190kb，编码150~200种蛋白。非洲猪瘟病毒抗体检测试剂盒主要包被蛋白有P30，P54，P62，P72和CD2v。不同的蛋白功能和适用的检测特点略有不同。 八方同创提醒猪场样本（采样）是指在疾病监测中，执行测试的材料或收集数据或材料进行测试的过程（采样）。猪流行性腹泻病毒PCR诊断试剂价目表

八方同创提醒猪场非洲猪瘟弱毒株阳性场猪群中有抗原抗体双阳猪只存在，需要送检抗体。猪流行性腹泻病毒PCR诊断试剂价目表

八方同创提醒猪场，猪场实验室PCR 检测结果的假阳性，按以下措施处理：首先假阳性结果已确定，需排查产生假阳性的原因。1、污染。（试剂，环境，样品排查）；2、样本提取的核酸不纯，存在PCR干扰物（核酸提取样品杂质不可过多，浑浊样品提前离心后取上层液体提取）。3、PCR试剂本身的特异性（任何检测方法的敏感性和特异性都无法同时达到100%，过分追求灵敏性高导致特异性降低）

如果猪场实验室PCR 检测结果显示，阴性质控品不成立，样品频繁出现假阳性，可以判断为实验室存在污染。 猪流行性腹泻病毒PCR诊断试剂价目表

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