越南家庭农场非洲猪瘟养殖技术要点

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 非洲猪瘟病毒可以通过污染物资、人员、车辆、饲料、水源、苍蝇蚊子老鼠等，甚至空气中的尘埃传入猪场。越南家庭农场非洲猪瘟养殖技术要点

非洲猪瘟活疫苗策略可追溯到1960年代，涉及在葡萄牙和西班牙田间条件下使用的减毒非洲猪瘟病毒毒株。然而，这些早期活疫苗导致慢性病变和病例数增加终被停用。近期的进展引入了几种有前景的活非洲猪瘟病毒疫苗候选株，能够在实验环境中提供针对攻毒实验组完全的或接近完全的保护。除了自然发生的变异株外，基因改造的缺失突变株，如“ASFV-G-ΔI177L”、“ASFV-G-ΔMGF”、“ASFV-G-Δ9GL/UK”和“HLJ/18-7GD”，已显示出对抗当前基因型II非洲猪瘟病毒毒株的潜力。此外，CD2ν（EP402R）缺失突变株也显示出一些前景，能够提供针对基因型I和II毒株的保护。天然衍生的非红细胞吸附病毒“Lv17/WB/Rie1”及其衍生物也被探索作为疫苗替代品。值得注意的是，病毒“ASFV-G-ΔA137R”在具有保护特性的缺失突变株中脱颖而出。因此，现在有多种活疫苗候选株可考虑用于潜在批准，其中至少两种已获准在越南市场销售。尽管如此，先前涉及不当使用可能非法疫苗的事件强调，在没有彻底临床评估的情况下，在现实场景中部署活疫苗需要谨慎。 东帝汶蓝通元非洲猪瘟检测技术八方同创提醒：非洲猪瘟病毒在环境中抵抗力强，耐低温不耐高温，70℃以上50分钟可完全杀灭。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟弱毒/基因缺失毒生物学特性如下：早期的研究已表明，ASFV具有较宽的温度稳定性和对潮湿及干燥具有极强的抵抗力，并高度抵抗某些化学物质（如胰蛋白酶和EDTA）和物理处理（如冻结/解冻和超声波）。在56℃1h和37℃1周后病毒仍能存活。无论是在0℃以下还是在4℃时，ASFV都表现出对环境条件的高耐受性，在长时间的贮藏过程中仍可保持活性。ASFV可以在多次冻融循环中存活，在4℃的环境中保存病毒血液的活性至少75周，而在无Ca2+或Mg2+的环境中保存病毒活性至少61周。病毒在粪便和尿液中（20℃下）可存活11d，木板上的血渍中可存活70d，而在血液中可存活15周。受污染的肉即使被腌制，其中的ASFV也可以在火腿中存活一年以上。

亚急性非洲猪瘟的病变与急性型相似但较轻。亚急性疾病的特征是淋巴结和肾脏大出血。脾脏肿大和出血。肺可见充血和水肿，某些病例可见间质性肺炎。在急性非洲猪瘟中，组织病理学病变见于血管和淋巴结/组织。这些病变的特征是出血、微血栓形成和内皮细胞损伤，伴有内皮下死细胞积聚(Gomez-Villamandos,Hervas,etal.1995a)。急性和亚急性疾病特征性的出血性脾肿大，是由于病毒复制导致脾巨噬细胞坏死，从而破坏脾结构所致。急性非洲猪瘟中的淋巴结/组织破坏主要见于淋巴组织的T区，但未报告病毒在淋巴细胞中复制的证据(Carrasco,Lara,etal.1996a;Carrasco,Lara,etal.1996b;Minguezetal.1988)。慢性非洲猪瘟的特征是呼吸道改变，但慢性型的病变可能轻微或不存在(GomezVillamandos,Hervas,etal.1995a;Mebus,House,etal.1983)。病变包括纤维性胸膜炎、胸膜粘连、干酪样肺炎和淋巴网状组织增生。纤维性心包炎和坏死性皮肤病变也很常见。非洲猪瘟病毒毒株呈现“致病力减弱、隐蔽性增强、适应性提升”的特征。

非洲猪瘟病毒的复制主要发生在侵入的单核细胞和巨噬细胞的细胞质中，尽管早期复制阶段也在细胞核中被描述。病毒进入通过网格蛋白介导的、发动蛋白依赖性的内吞作用和巨胞饮作用(Galindoetal.2015;HernaezandAlonso2010;Sánchez,Quintas,etal.2012)。肌动蛋白依赖性内吞作用和涉及微管活性的内吞流也参与其中，表明存在经典吞噬作用(Bastaetal.2010)。细胞受体及其病毒配体的身份仍未知。CD163曾被提议为推定受体(Lithgowetal.2014;Sánchez-Torresetal.2003)，但CD163基因敲除猪对非洲猪瘟病毒仍完全易感(Popescuetal.2017)。非洲猪瘟病毒属于非洲猪瘟病毒科，该病毒只危害家猪和野猪，对人不存在危害。越南家庭农场非洲猪瘟养殖技术要点

非洲猪瘟病毒弱毒株具有明显的间歇性排毒特点，口鼻拭子采样很难捕抓到病毒，建议增加环境和尾根血采样。越南家庭农场非洲猪瘟养殖技术要点

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，近期的研究再次表明，ASFV在4℃、22℃和40℃时稳定，在EMEM中培养24h后，损失不到10个50%血细胞吸附剂量（HAD50）/mL。组织中的ASFV可以在深度冷冻（-70℃）条件下存活多年而没有明显的滴度损失，但在20℃时会逐渐失去活性，但仍可存活至少105周。在4℃时，病毒在培养基中非常稳定，至少在61周内保持活性。在较高温度下，ASFV失活相对较快，在37℃下，ASFV在细胞培养基中可保持活性11~22d，但在50℃时，只有少部分病毒保持活性，而在60℃时，15min后就检测不到活毒粒子。越南家庭农场非洲猪瘟养殖技术要点

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