对您的特定应用，增加（和优化）试剂浓度和培养时间。 检查确保检测试剂按建议的方法正确贮藏和使用。 从抗体缓冲液中除去吐温。 配制少量工作液（1mL），在暗室中加入HRP偶联二抗1mL。 应观察到可见的蓝光。 在再杂交过程中可能有抗原损失。 信号较弱 在凝胶上的蛋白不足 在凝胶上载入更多的蛋白，或在载入之前浓缩样品，或使用免疫沉淀以增加在凝胶运行的中靶蛋白量。 使膜曝光时间延长（1-2小时）。 转移到膜上的蛋白过少--优化转膜条件，如转膜缓冲液pH、膜类型和电压等。上海标签抗体哪家靠谱？徐汇区Sigma抗体抗体参数
关于抗体质量 抗体的质量决定了整个免疫检测的成败， 是在选择抗体时优先的考虑因素。 通常认为，特异性决定抗体功能，所以抗体必须拥有高质量，尤其是商业化的抗体。然而出人意料的是，通常情况并非如此。尽管理论上确实可以模拟和预测抗体结合的特异性，但是数十年的使用经验证明，一些因素如免疫原的抗原性和***性、抗体浓度、缓冲液、免疫作用和样品制备等因素都会对交叉反应和非特异性结合起到***的促进作用。 自70年代以来，当研究人员开始将抗体用作蛋白探针时，抗体性能不一致的问题一直困扰着他们。上海H3抗体抗体联系电话上海益启生物的抗体询价联系方式。
与技术支持部门协商，以便进行适当的方案修改。校准移液管 确认在所有洗涤步骤中所有试剂都已完全***。见上文。 在所有解育步骤中应采用垂直微孔板振彩器振高做孔板，其速度应使横珠处于怛定运动状态，但不引起飞践。当再使用封闭剂时，检查没有任例试养触及封闭剂。 当使用相同移液器吸头对不同孔添加试剂判应小心，移液器眼头不得触及微孔板中的试剂。 免疫组织化学/免疫细胞化学(IHC/ICC)、免疫组织化学（IHC）是指通过特异性抗体-抗原相互作用，检测在组织切片中目标抗原（如蛋白）的过程。
未加入链零亲和素-藻红蛋白前育温度、时间或需荡不适当校准目标值设置过高 对照物和样品在微孔板上解育时间过长样品中含有的分析物流度高于分析动态范围 样品不含分析物或所含分析物任于可检测水平 多道移液器可能没有校准微孔板洗涤不均匀 样品可能含有较高水平的颗粒物或其它干扰性物质微孔板振荡不足 孔间交叉污染 根据生产厂家说明书调整吸液高度，超声处理模珠小眶，涡旋，然后根据方案立即加到微珠是合小瓶中。间教性理动在题中的微珠混合物，同时用移液器移取到微孔板上。上样探计也可能需要用精冲、反冲洗和洗海等方法清洁;或如有需要，应取下保计并超声处理。多种科研抗体的直销公司。
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。益启生物提供专业的多种正规科研抗体。青浦区Abcam抗体抗体哪家好
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Troubleshooting 问题 微珠计数不足 本底过高 微珠不在制定的区域内或圈门中 整个微孔板的信号与本底相同 阳性对照的信号任样品信号过高或饱和 样品信号过低 样品和/或标准品CV值较大 微孔板洗板机吸液高度设置过低微珠混合物配制不当 样品颗粒物或粘度引起干扰 没有正确调整探针高度 本底孔受污染 洗涤不充分 Luminex只器没有正确校准或近期没有校准 没有正确词整门设置 微珠区域设置错误所用样品类型不正确只器没有洗涤或primed 做珠暴露于光下检测不正确或检测不到未加入抗体徐汇区Sigma抗体抗体参数
