配制培养基应遵循的几个原则:1、目的明确:培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同;2、营养协调:微生物细胞组成元素的调查或分析,是设计培养基时的重要参考依据,微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。3、理化适宜:指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。4、经济节约:配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份,特别是在发酵工业中,以降低生产成本。培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。陕西琼脂灭菌 培养基制备器
培养基配制--容器和水:配制培养基所用的容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器,培养基配制所用的容器和配套器具应洁净,可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质残留。在大体积配制培养基时,企业也可根据自己的情况采用不锈钢容器,建议专锅,且容器应洁净。不建议使用陶瓷或搪瓷容器。培养基用水是培养基制备过程中非常重要的一个物质。不可以使用自来水,自来水中的杂质可能会对检验结果有一定的影响。许多法规在培养基配方中采用蒸馏水作为配制用水,实际上纯化水的洁净程度不差于蒸馏水,甚至更优,所以不必单独制备蒸馏水,直接使用纯化水即可,配制用纯化水应按药典的要求定期进行检测。江苏培养基制备器报价在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。
过滤:配成的培养基,若无特殊要求,可省略此步。若有沉淀或浑浊,需要澄清的,液体培养基可用滤纸过滤。而固体培养基可用中间夹一薄层脱脂棉的双层纱布过滤。如果过滤法还不能达到澄清的要求,则可用蛋清澄清法,即培养基加热冷却到50℃~60℃,装入三角瓶内(不超过容量的二分之一),按1000ml加入1个~2个鸡蛋的蛋清,用力摇晃3min~5min,高压蒸汽灭菌121℃、20min,取出趁热过滤即可。摆斜面:装在试管中的琼脂培养基,在灭菌完成后,趁热立即摆放在木棒(或玻璃棒)上,并完成适时地斜度,冷却后,琼脂凝固即成斜面。斜面长度不要超过试管的二分之一。
制备的方法和注意事项:1培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,好终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点。
湿热灭菌:湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行,高压灭菌一般采用121℃±3℃灭菌15min,具体培养基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。培养基体积不应超过1000mL,否则灭菌时可能会造成过度加热。所有的操作应按照标准或使用说明的规定进行。灭菌效果的控制是关键问题。加热后采用适当的方式冷却,以防加热过度。这对于大容量和敏感培养基十分重要,例如含有煌绿的培养基。过滤除菌:过滤除菌可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2μm的无菌设备和滤膜。消毒过滤设备的各个部分或使用预先消毒的设备。一些滤膜上附着有蛋白质或其他物质(如物品),为了达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。河北Systec培养基制备器
半合成培养基在合成培养基中,加入某种或几种天然成分。陕西琼脂灭菌 培养基制备器
根据培养基的用途来区分,可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。1)选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或克制不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等克制原核微生物的生长;而制霉菌素、灰黄霉素等能克制真核微生物的生长;结晶紫能克制革兰氏阳性细菌的生长等。2)增殖培养基在自然界中,不同种的微生物常生活在一起,为了分离我们所需要的微生物,在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基,这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲,增殖培养基也是一种选择培养基。3)鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。陕西琼脂灭菌 培养基制备器
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