微生物检验培养基制备的要点:调培养基pH,虽然中海培养基中含有缓冲物质,可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内,但如果配制的培养基不能要求,则必须进行必要的调整。如果您有校准过的pH计,则可以使用pH计。如果没有,可以使用精确的pH试纸,然后根据需要使用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸进行微调。使用0.1氢氧化钠或0.1mol/L盐酸进行调整至所需的pH值。培养基有酸性或碱性,pH值一般为7.4~7.6。对于需要用氢氧化钠高压灭菌的介质,将pH调至比要求值高0.1~0.2个单位,因为用氢氧化钠调节时,高压灭菌后介质的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培养基中含有碳酸钙,则无需调整pH值。培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要。河北Systec培养基制备器
根据培养基的用途来区分,可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。a.选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或压抑不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等压抑原核微生物的生长;而制霉菌素、灰黄霉素等能压抑真核微生物的生长;结晶紫能压抑革兰氏阳性细菌的生长等。b.增殖培养基在自然界中,不同种的微生物常生活在一起,为了分离我们所需要的微生物,在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基,这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲,增殖培养基也是一种选择培养基。c.鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。内蒙古进口培养基制备器培养基的实验室制备:正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。
培养基配置原则:营养物质浓度及配比合适,培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不但不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在发酵生产过程中,可以通过控制培养基中有效氮(或碳)源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与的合成协调。
培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。
培养基的使用:1.琼脂培养基的融化:将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。培养基制备器试管塞不要塞得太紧(使用硅胶塞的时候),勿使用橡皮塞。河北Systec培养基制备器
培养基制备器真彩色液晶屏显示,触摸屏加按键操作。河北Systec培养基制备器
利用三角培养瓶制备培养基:包扎,分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌,按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面,灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。贮存,培养基在30℃下放置,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养基是细胞生长的必需营养物质,利用三角培养瓶制备培养基可按照以上步骤操作,在使用前需确保培养基的无菌性,以免影响细胞正常繁殖。河北Systec培养基制备器
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