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肝纤维化模型实验动物模型

1.诱导方法:1)成年雄性小鼠40%CCL4,皮下注射或灌胃5mL/kg。每三天/次,连续8周。成年雄性大鼠皮下注射60%CCl4(3ml/kg),每周2次,共9周。2)成年雄性大鼠1%二甲基亚硝胺DMN(10mg/kg),1次/d,2次/周,连续4周。3)成年雄性大鼠腹腔注射硫代乙酰胺(100mg/kg)隔日腹腔注射1次,连续13周。4)成年大鼠,灌胃给白酒7g/kg体重,每日晨1次,连续24周。

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裸鼠瘤模型是比较常见和常用的一种瘤动物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。

造模方法:

1、细胞是贴壁细胞,细胞培养在RPMI-1640培养基中细胞传代培养:当细胞长至80-90%时,去除培养基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化,将消化的细胞转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。倒掉上清后,加入3ml培养基重悬细胞,1:3传代至培养皿中培养。

2、将长到培养皿80%-90%的细胞用胰酶消化下来,1000rpm离心,去除上清,加入完全培养基重悬细胞,将细胞分别种在6孔板中,每孔种1×105个细胞。

3、将细胞进行扩增培养,对细胞进行计数,将数量调整为2×107个细胞/ml。5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后,随机分为3组,每组分别在右腋皮下接种2×106(100ul/只)细胞。接种约两周后出现结节,每周瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养4周后处死裸鼠,取裸鼠瘤拍照冻存。 实验动物模型实验实验动物模型建立,就找英瀚斯生物。

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阿尔茨海默病实验动物模型。目前常用研究AD的实验动物有非人灵长类动物与啮齿类动物,在选择时遵循“减少、替代、优化”的3R原则。非人灵长类动物与人类的脑部解剖结构、神经病变特点以及生物行为模式相似,尤其是恒河猴,在其脑中观察到含有Aβ沉积的老年斑和神经原纤维缠结现象,无论是自发还是诱发模型,都能够较好的复制AD相关的病理及生理特征,但是昂贵的费用与稀少的资源限制了非人灵长类动物的大量应用。啮齿类动物虽然在病变模拟方面不如非人灵长类全方面的,但是具有价格低廉、资源范围很广的、生存率高等特点,与人类的脑部解剖结构与生理特征也较为相近,更适于诱导模型的大量制备,成为AD应用更范围很广的的动物模型。许多AD小鼠模型的背景品系是C57BL/6J小鼠,然而这种品系的小鼠似乎对类似AD的神经病理学具有特别的抵抗力。

一型糖尿病实验动物模型构建:

胰腺中的胰岛β细胞变性和坏死,分泌的胰岛素不足。

诱导方法一:STZ诱导糖尿病模型。注射前用0.05mol/L柠檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液,新鲜使用。大鼠糖尿病STZ的剂量为40~75mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。小鼠对此药敏感性较差,常用量为100~200mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。

诱导方法二:四氧嘧啶糖尿病动物模型四氧嘧啶糖一次腹腔注射150~200mg/kg或静脉注射40~100mg/kg。用药后2~3小时后出现初期高糖,持续6~12小时后进入低血糖期,动物出现痉挛,24小时后一般为持续性高糖期,β细胞呈现不可逆性坏死,发生糖尿病。

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实验动物模型的灌注取材方法:

小鼠灌注灌流

固定小鼠时我一般采用输液器的针头(4号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,刺入心尖3~4毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约40毫升生理盐水,后再灌流约20毫升多聚甲醛,整个灌流固定的过程就完成了。

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大鼠灌注

按大鼠体重,用2%戊巴,比妥钠(0.25ml/100g)进行腹腔注射麻醉,开胸暴露心脏,向左心室内注射1%肝素钠0.2ml后经左心室行主动脉插管,血管钳固定后剪开右心耳,先以生理盐水150ml快速冲洗血管,然后用4%多聚甲醛的0.01mol/LPBS(4℃,PH7.40)250ml灌注固定,先快后慢,共需时间为50min,之后取材,置4%多聚甲醛固定液后固定,在4℃冰箱内保存。多聚甲醛进入大鼠体内,大鼠会出现四肢、尾的抽搐,**终以肝脏发白、内脏鼓起即灌注好。 英瀚斯实验动物模型,消化系统、呼吸系统、生殖系统各类模型。河北常见实验动物模型多少钱

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5XFAD转基因实验动物模型。5XFAD小鼠在小鼠Thy1.2启动子的控制下过度表达人类APP和PSEN1蛋白,共有5个AD连锁突变,分别是APP中的瑞典(K670N/M671L)、佛罗里达(I716V)和伦敦(V717I)突变,以及PSEN1中的M146L和L286V突变。1.5个月大的5XFAD小鼠就开始出现Aβ沉积。5XFAD小鼠在大脑中积累的Aβ42多于Aβ40,这表明5个FAD突变累积影响Aβ42的产生。然而,在5XFAD小鼠中未观察到tau过度磷酸化和NFTs的形成。2个月大时出现星形胶质细胞增生和小胶质细胞增生,表明神经炎症发生在该模型早期。5XFAD小鼠再现了人类AD的病理学,类似于Tg2576、APP23和APPPS1模型。湖北提供实验动物模型制作方法

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