体回收率差。 印迹大会和总议定书 1.用支撑层（蓝色边缘）握住吸墨纸托并弄湿膜层（白色）在润湿过程中溢出水提供的托盘。不要弄湿支撑层。放置湿的滚动板上的污点固定器。2.如果需要，将印迹预先在甲醇和水中浸湿，然后将其放置在印迹支架中心，蛋白质面朝下。注意：印迹不得超过材料中指定的尺寸必填部分。3.轻轻滚动印迹以去除气泡，然后稀释印迹保持并滚动一次。4.打开吸墨纸固定框架，用力将吸墨纸固定在蛋白质面朝上，然后将其放入框架中。一个缺口吸墨架可确保正确放置在框架中。注意：如果只在框架中运行一个MultiBlot，请放置孔空白卡在第二口井中。5.关闭并锁定框架。加入30 mL封闭溶液（MultiBlot为15毫升）。向下按框架并转动系统旋钮施加真空。当框架完全为空时，关闭真空。注意：如果使用抗体回收托Merck样本制备仪上海授权代理商。松江区MerckWB实验加速器Merck仪器联系人
15分钟。图4.扩展孵化（过夜）：SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5％NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒，标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，对于HRP偶联的二抗山羊抗兔（AP132P），将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后，将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化（1小时）：，SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免闵行区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器关于细胞分析仪的询价电话。
你带盖框架（1）迷你吸墨纸架（2）SNAP1.d.2.0迷你吸盘固定架（双包装）SNAP2FRMN021个迷你带盖框架（2）迷你吸墨纸架（4）SNAPLd.o2.0MidiBlot固定框架（单个包装）SNAP2FRMD011个带盖Midi框架（1）Midi吸墨纸架（2）SNAPl.d.2.0Midi印迹固定框架（双包装）SNAP2FRMD021个迷笛中框（2）Midi吸墨纸架（4）SNAPl.d.2.0MultiBlot固定器（包括2个孔空白）SNAP2BHMB05050SNAPi.d.2.0迷你吸管座SNAP2BHMN0100100SNAPL.d.e2.0Midi污点持有人SNAP2BHMD0100100SNAPi.d.o2.0抗体收集盒SNAPABTR20快照印迹辊SNAP2RL印迹
utiBlot框架用于在MultiBlot框架中进行单点印迹时，放置正确处理一次印迹，然后空白卡在空井。未放入空白卡空井清洁不足确保框架**的所有系统垫片和阀门均处于院长，无碎屑或盐分。清空真空瓶，然后更换串联的Milx9-FA过滤器。可能由于以下原因堵塞了吸盘座：浓度在补充有缓冲剂的缓冲液中使用0.2-0.5％的干奶脱脂/低脂干0.1％Tweens 20表面活性剂，带有新的污点固定器。牛奶太高不兼容的封闭液使用新的吸盘固定器更换为强力封闭液。吸墨纸架的重复使用吸笔座只供一次性使用。请勿重复使用。低信号或低信号初级和/或次级将抗体浓度增加5到8倍。比标准抗体浓度过低免疫检测上下颠倒标记印迹的蛋白质一侧，并确保该污点检测试剂不敏感更换灵敏度更高的检测试剂，例如足够的Luminata用Forte采购正规细胞计数器哪家靠谱？
关闭真空。同样，溶液将被吸收到印迹架中，并且表面可能看起来干燥。重要提示：孵育10分钟后，再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟，直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液（对于MultiBlot为15 mL）。重复洗涤步骤3次（共3次）4次洗涤）。12.关闭真空，然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点，并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白，则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育：一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL（对于MultiBlot），5 mL（对于Mini blot）或10 mL（对于Midi blot）1X一抗（浓缩液）通常在标准免疫检测过程中使用）。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话，将其从底座益启生物公司带您了解Merck仪器。黄浦区Merck微流控细胞芯片分析仪Merck仪器咨询问价
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P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印迹框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗体量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗涤缓冲液*量每孔4x 15 mL每个4x 30 mL每个4x 30 mL●Tris或磷酸盐缓冲盐溶液，补充有0.1％Tweene 20表面活性剂在计算免疫检测所需的抗体量时，三个要素对于成功检测出蛋白质并获得了高质量的印迹（低背景，高信号）：●样品类型和凝胶上样浓度●一级和二级抗体浓度●检测试剂的种类和灵敏度下表中的所有抗体均使用LuminataTM Forte化学发光检测试剂进行了测试。对于SNAP i.d. @ 2.0系统，抗体浓度高于标准免疫检测中的浓度，但浓度较低体积。 表3.标准免疫检测中一抗稀释的实例 SNAPi.d.®2.0免疫检松江区MerckWB实验加速器Merck仪器联系人
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