目的制备高含量细胞因子的血小板裂解液(PL).方法采用反复冻融法[-80℃~37℃冻融3次(冻24 h/次)]和超声法(285 W,每次超声处理5 s停止5 s,共10次)处理10份单**小板制剂(30 m L/份),ELISA法对细胞因子,血小板衍生长因子(PDGF)-AA,PDGF-AB,PDGF-BB,转化生长因子-β1(TGF-β1),血管内皮生长因子165(VEGF165)检测,同时将2种方法制备的PL按10%比例加入常规培养基DMEM/F12培养第5代人脐血间充质干细胞,观察传至第7代细胞增殖情况,并与FBS液培养(组)比较.结果血小板保存3 d后制备成的PL各因子含量均升高GMP级人血小板裂解液, 富含各类生长因子, 是很好的胎牛血清替代物。临床用血小板裂解液使用说明

细胞zhi liao的生产是一项费时又昂贵的工程。优化生产工艺通常会涉及优化培养参数去减少时间、降低成本,同时提供呈现预期疗效的表型。细胞增长所需的培养基补充剂也是整个细胞生产工艺中的一个较关键的因素。胎牛血清(FBS)一直以来被作为是细胞培养的常用补充剂,但因涉及伦理和安全问题,如今从加工过的血液中提取的人源培养基补充剂已经得到越来越多的使用。血小板因其在血栓形成中的作用而闻名,很近,血小板被认为是伤口部位再生过程的关键介质。血小板裂解过程中释放的生长因子和细胞因子可调节局部免疫应答,并启动局部组织的加速恢复(图1)。考虑到血小板在人类生物学中这些作用,也就不难理解为什么处理过的血小板裂解液能够给细胞培养基提供可靠的促生长特性了。临床用血小板裂解液使用说明血小板裂解液用于无血清分离和传代培养脐带间充质干细胞的方法。

血小板裂解液主要成分为人血小板裂解液,含有较高浓度的生长因子等细胞培养必须物质,在体外细胞培养和细胞zhiliao中可代替胎牛血清和自体血清。人源血小板裂解液就是直接将人类来源血小板细胞经过连续的反复冻融裂解后,进一步提纯这些血小板脱颗粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自体或异体血小板富集物经细胞裂解后的产物,已经被诸多研究推荐作为胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的替代品,应用于间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大规模扩增培养。
解冻后的血小板裂解液在4°C的保存时间不建议超过24小时,否则会影响性能Sexton进行了内部研究,以检查保存在4°C冷藏温度下的解冻hPL的稳定性。对Stemulate和nLivenPR都进行了检查,以确定解冻的产品在4°C下可以储存多长时间,然后才会影响性能和放行指标。根据结果,不建议在添加到基础培养基之前将解冻的hPL产品在4°C冰箱中储存超过24小时。数据表明,在初始解冻后在4°C下储存超过24小时时,渗透压和生长性能会发生统计学上的显着变化。虽然结果在解冻后5天内仍处于合格参数指标范围内,但建议尽快使用该产品,以减少使用之间的差异以及和COA上的偏差。血小板裂解液不含异源动物成分,是人类间充质干细胞培养的理想血清替代物。

血小板裂解液解冻后请立即进行培养基的配制,配置好的培养基在2-8°C环境下保存并尽快使用,不建议超过21天。如解冻后的原瓶无法全部使用,建议按需分装成合适的小瓶中进行-20°C保存一旦产品瓶或袋经过初始解冻过程,建议尽快将产品置于基础培养基中。尽管对于储存在2-8°C的准备好的含有hPL的培养基,Sexton的内部测试有效期为21天,但建议客户进行内部验证研究,以确定其基于血小板裂解液的完整培养基的有效期。使用的基础培养基和添加剂等变量可能会缩短或延长完整培养基产品的有效期。血小板裂解液怎么样使用?临床用血小板裂解液使用说明
血小板裂解物是由富含血小板的血浆纯化萃取而成,其中包含很多不同的细胞生长因子。临床用血小板裂解液使用说明
Sexton的血小板裂解液系列产品使用干冰运输,全程确保产品处于冻存状态。接收后立即储存在-20°C环境中,使用的时候必须使用37°C水浴解冻,而非4°C冰箱或室温解冻方法,否则会产生更多碎片,影响性能。对于不立即使用的整瓶/袋解冻的血小板裂解液产品,建议将剩余体积制备成一次性使用的等分试样。在满足生物血清相容性和低温要求的条件下,可以使用锥形管或较小的瓶子进行等分储存。等分试样的制备将减少血小板裂解液产品的冷冻/解冻循环。 临床用血小板裂解液使用说明
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