芜湖正规无血清细胞冻存液厂家

无血清细胞冻存液与含血清细胞冻存液对比：传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，统称为含血清细胞冻存液。含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），较后才移至液氮罐中进行长期的储存。可见，含血清细胞冻存液冻存细胞时遇到的问题：1.冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液，此步可省略)。2.需要程序降温（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步骤繁琐，耗时耗力。3.含血清，细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高。4.血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异。5.需液氮冻存，且不能原位（如孔板）冻存。无血清细胞冻存液产品特色：可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省钱）。芜湖正规无血清细胞冻存液厂家

细胞冻存注意事项：离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。北京无血清细胞冻存液厂家可以在冰晶形成之前，优先结合细胞外的水分子。

细胞冻存秘籍：低温储存始终保持储存温度低于-130°C。细胞可以在更高的温度下存活，但生存力通常会随着时间的推移而降低。理想的储存容器是液氮罐，其中细胞或者被浸没在液氮中，或者被悬浮在液氮上方的蒸汽相中。出于安全原因（以下＃6），推荐气相储存。要维护液氮中储存的细胞需要记住以下几点：A. 确保标签系统适用于（长久）低温储存。B. 保持良好记录，包括细胞储存位置，生长特点和操作记录。C. 请频繁检查液氮罐的状态（较好每天或至少每周一次）。有多种商用警报系统可用于持续监控其状态。珍贵细胞应至少存放在两个不同的地点。

以前在另一家实验室的时候，冻存细胞根本就没有讲究这些标准操作。冻存的细胞有293T、PT67、C2C12、MEF(鼠胚胎成纤维细胞）、HelaS3、HelaD、U2OS、HKC、RK3E、ECO、H292、HSY、COS7、SupT1等。将细胞酶消化后直接参与离心，加入冻存液（含90%的血清和10%的DMS0)，直接放在-80℃冰箱。两三天后移入液氮中，较久保存，几年后细胞的活力仍没有什么受损，照常能复苏，成活率高。但有三点须注意：（1）一是细胞的生长状态要好，不能长得过稀，同样也不能过密，细胞的状态看起来相当健康。70%密度的要保存的细胞须再长24h才能全满，万一细胞状态不好，可以酶消化后再繁殖一次；（2）冻存细胞的量要留心，不能太密也不能太稀，一般1OOmm培养皿的细胞冻存为3~4管；（3）存放在-80℃冰箱的时间不能过长，一两天后转移到液氮罐里。我们也曾取出存放在-80℃冰箱的细胞，半年还有30%~50%的细胞有活性，但一年的细胞就没有活的。无血清冻存液特性：复苏细胞存活率高。

细胞冻存配制含10%DMSO或甘油的细胞冻存液，4℃预冷（新鲜配制的冻存液会产生大量的热）；取对数生长期的细胞，用细胞消化酶将单层生长的细胞消化下来；悬浮细胞则直接将细胞收集到离心管中；离心1200rpm，6min；去除上清液，逐渐加入适量预冷的细胞冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中的细胞终浓度为5×10e6/ml~1×10e7/ml；将细胞分装入冻存管中，每管1~1.5ml；在冻存管上标明细胞的名称、冻存时间及操作人员姓名；冻存：标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/min；到达-80℃时，则可迅速放入液氮中。无血清冻存液用途：为确保产品质量，请避免反复冻融相关产品。正规无血清细胞冻存液厂家

无血清细胞冻存液：冻存细胞，无需程序降温。芜湖正规无血清细胞冻存液厂家

无血清细胞冻存液：产品优势：1.化学成分明确，无任何外源蛋白和血清，适用于各类动物细胞株冻存。 2.无需程序降温，细胞复苏率90%以上。 3.冻存细胞可直接存放于-80℃冰箱，稳定保存数年。 4.即用型产品，4℃可稳定保存。细胞冻存：1.收集融合率>90%的对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于离心管中。2.1000 rmp离心5分钟，去除离心管中的上清液，收集细胞沉淀。3.加入适量细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为1x106～1x107 cells/mL。头轻柔吹打混匀,Z成细胞悬液。4.将离心管中的细胞悬液分装与细胞冻存管中，每管1mL或1.5mL。5.将分装好的细胞直接冻存于-80℃冰箱中，可稳定冻存数年。6.如若长期保存，可在次日转移至液氮中。芜湖正规无血清细胞冻存液厂家