一种基于鼠尾胶原蛋白:1.一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,为鼠尾胶原蛋白、聚乙烯醇、壳聚糖、水制成的冻干止血材料,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为 1-10% 0. 2-5% 0.2-2%,余量为水。2.根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于冻干止血材料中,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量的水。3.根据权利要求1或2所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾胶原蛋白来源于各品系SFP级大鼠鼠尾。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。南京鼠尾胶原生产厂家
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬 片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通 过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于 培养瓶内。 实验设备及材料: 大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理 盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容: 1、制备鼠尾胶原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。芜湖郑州鼠尾胶原在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。
鼠尾胶原蛋白的获取也相当“讲究”,首先要以无毒方法捕到家鼠。取尾长20cm以上者,齐尾根部切下尾巴,洗净后浸于75%酒精中。在无菌操作下剥去鼠尾皮肤,即可见附于鼠尾骨上的4束韧带。每束韧带中,位于外面及近骨一面的为白色纤维,较光洁,微发亮。纤维之间为易碎裂的间质。而剥去下来的“纤维”,就放置在嘉兴眼库中,以供需要时及时提取。让小小的老鼠尾巴发挥其神奇的作用,以医学人严谨、踏实、不断进取的医学态度,让鼠尾胶原蛋白帮助更多的人,恢复角膜的光明,重现光明的世界。
胶原蛋白的提取方法:酶法提取:酶法提取是利用蛋白酶使胶原溶解,水解条件温和,反应速率快,提取的胶原蛋白仍有完整的三股螺旋结构,蛋白纯度高,理化性质稳定,且无环境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶、胰蛋白酶或者复合酶。工艺可选择一步法,即利用酶液直接提取;二步法,即先用酸或者碱进行初步提取,然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO预处理革屑,然后用碱性蛋白酶提取胶原的水解产物。Cabeza L.F.T等[7]先用胃蛋白酶,再用碱性蛋白酶提取了2种不同的胶原水解产物。赵苍碧等[2]采用胃蛋白酶和无花果蛋白酶消化法从牛腱中提取胶原蛋白,探讨了酶和酶的加入量对提取结果的影响,给出了酶对胶原提取较佳工艺配比,酶与牛腱的质量比为0.1时效果较佳,而使用无花果蛋白酶时,0.01的配比较佳。细胞培养器皿的表面包被以包被浓度为2μg/cm2为例。
鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用; (2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200〜400目; (3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀,鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL〜I克:120mL,期间不断搅拌,防止冻结成块,得到胶原溶胀液; (4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中,鼠尾腱与蛋白酶质量比为50: I〜100: 1,在4°C,48〜74小时酶解,期间间歇性搅拌。吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。石家庄鼠尾胶原服务电话
自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性。南京鼠尾胶原生产厂家
使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被:以包被浓度为2μg/cm2为例,用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中,确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干,也可以在室温放置1小时后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备:A、无细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)将200μL本品加到置于冰浴的离心管中,加入690μL双蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。南京鼠尾胶原生产厂家
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。B.含细胞的三维胶原的制备(以配制200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10PBS10培养液,混匀(混匀后pH左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放20分钟待胶凝固后,加入适...