外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体：300μg样品（相当于300μg总蛋白）用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释，与protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上（以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰），请参考默克磁珠操作说明书。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推荐使用试剂目录号信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准，相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心，用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题，真是惠而不费，不亦乐乎？超滤浓缩管的主要优势是什么。闵行区默克超滤浓缩管批发
Millipore超滤浓缩管设有反转离心回收设计使蛋白样品，特别是小体积样品回收，避免吸头吸取造成的样品丢失或操作错误； 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式样品吸附损失小； 合理的死体积设计，避免样品离干而降低回收率； 能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化，并满足下游各种应用的要求，使研究者处理样品时倍感轻松。 有效浓缩同时保证高的蛋白回收率 设计精巧、紧凑，一体化结构确保不会发生渗漏，即使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作。离心浓缩管联系电话超滤浓缩管的好处有很多。
这是一种用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。 为了与下游应用兼容，常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长，多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活，而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新，需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。 Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准 操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果，数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体，减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差，使蛋白样品的处理更加标准化，数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。
抗体标记 适合25-200μg样品操作 5次低速离心，总耗时~50分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 加入抗体样品 • 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL） - 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。 • 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。 - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。 大体积样品浓缩 Centricon® Plus-70离心浓缩装置 用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。 超滤浓缩管的优点有很多。
***的化学兼容性 •膜与管壁采用特别的热封工艺，避免使用胶水 带来的化学溶出对样品的污染 •Ultracel® 超滤膜和聚丙烯管材性能稳定，化学 兼容性好 •pH3-10 适用 特别推荐应用（提供实验报告作为参考） Amicon® Ultra 离心超滤管： • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 尿液中蛋白质的浓缩 • 游离标记物的去除 • 抗体的快速浓缩 • 血清多肽生物标志物的纯化 • 双向电泳蛋白样品制备 • 样品去垢剂的去除 操作更安心 •设计精巧、紧凑，一体化结构确保不会发生渗漏，即 使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作 •性能稳定，数据平行性、重现性好，适合精细操作和 高通量操作买超滤浓缩管找益启生物公司。金山区默克超滤浓缩管代理价格
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虽然影响因素较多，我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以比较大化样品的回收，同时节省过滤时间。截留微滤中膜的孔径大小通常以微米计，表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据NMWL分级，有时也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见，实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时 膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时，孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时，需要谨慎地选择合适的 NMWL膜和设备。虽然影响因素较多，我们通常建议截 留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以比较大化样品的回收，同时节省过滤时间。闵行区默克超滤浓缩管批发
