江西如何使用糖原染色试剂盒

糖类染色实验——糖原染色：高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3～5 min。8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 min。故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。江西如何使用糖原染色试剂盒

PAS染色的临床意义①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed-Sternberg细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性反应，且空泡中心为阴性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，后者呈强阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状或粗颗粒状，有时呈红色块状。白细胞系统：急性淋巴细胞白血病时白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色粗颗粒状或红色块状，底色不红；急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色细颗粒状或呈均匀红色；急性单核细胞白血病时，白血病性原始单核细胞的阳性反应物质呈红色细颗粒状，弥散分布，有时在胞浆的边缘处颗粒较粗大。山东如何使用糖原染色试剂盒直销价切取材料时刀要锐利，避免因挤压细胞使其受到损伤。

染色试剂盒：GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因 (β-glucuronidase)，是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶。该基因产物为β-葡萄糖苷酸酶，属水解酶类，相当稳定而不易降解，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被普遍应用于基因调控的研究中。根据GUS基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法较高）。其中较为常用的是组织化学法。

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂 配制：（1）0. 5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入 蒸馏 水成1000ml） 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。细胞核、染色体以及基因表达的研究。

特殊染色化学试剂的选择：化学试剂的选择主要针对自配试剂而言，对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂，特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂（如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等）是保证高质量染液的前提和关键，特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液（抗酸、无色品红、醛品红等）中均为主要试剂，其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时，所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格，则会导致染液配制失败，无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。天津糖原染色试剂盒厂家现货

糖类从组织化学技术角度来分，可分为多糖、中性粘液物质。江西如何使用糖原染色试剂盒

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能较好地保存糖原，但有使糖原流动到细胞一侧的现象，多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存，是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能**白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此较好不单独使用乙醇固定，以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。江西如何使用糖原染色试剂盒