截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。超滤浓缩管的优势您了解多少呢?黄浦区超滤浓缩管批发
经典离心浓缩装置 Amicon® Ultra 离心超滤管 反转离心回收 •反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品高效 回收,避免***头吸取造成的样品丢失或操作错误 •0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式 样品吸附损失小 •Ultracel® 超滤膜为密理博超滤产品特有的设 计,非特异吸附比较低,减少样品的吸附损失 •膜和聚丙烯管都是低吸附材质,保证> 90% 回收率 •竖膜切向流设计,不像横膜那样容易堵,样品 损失少 •浓缩速度超快,**少需 10 分钟嘉定区默克超滤浓缩管哪家优惠超滤浓缩管的优缺点您知道吗?
多台同时操作模式 借助Amicon®超滤杯多台操作连接装置可以同时运行多达3个超滤杯。 Amicon® stirred cells 耐溶剂型搅拌式超滤杯 用于对在有机溶剂中的样品进行浓缩和缓冲液置换。有 47mm 和 76mm 两种规格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等会降低碳氟化合物材质 O 形圈的使用寿命。 特点与优点: 采用圆柱形硼硅酸盐玻璃容器和 PTFE 超好化学兼容性超滤膜 可预装膜后进行高压灭菌 直接从上面操作,避免拆卸装置的麻烦 组件少,易于清洁和组装 配套使用 47 或 76 mm 直径预切膜片 应用: 带有有机成分的样品的浓缩、换液
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。益启生物公司作为上海一家专业从事超滤浓缩管代理销售。
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。 7. 4,000×g离心15 min。 8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 用Protein A或G对抗体进行亲和纯化超滤浓缩管的优点有很多。浦东新区默克4ml超滤浓缩管代理价
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7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。 7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。 8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。黄浦区超滤浓缩管批发