首先,Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查: a)是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方法请垂询。 c)离心机**近是否有校准过? d)是否***尝试这个蛋白?超滤浓缩管的主要优势是什么。无锡默克2ml超滤浓缩管代理商
通量(超滤效率)及其影响因素 超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的 通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时 会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参 与影响通量的因素很多,包括: 压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力 (TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯, 这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚 至可能随着压力的增加而降低。无锡默克超滤浓缩管销售益启生物公司的超滤浓缩管种类繁多。
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置 Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯 Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(达 百分之十)达分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。超滤浓缩管直销公司。
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过 程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。益启生物公司专业致力于超滤浓缩管代理销售。杨浦区浓缩管报价
对于不同的需求我们选择不同的超滤浓缩管系列。无锡默克2ml超滤浓缩管代理商
特点与优点 温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性 所有型号都可以高压灭菌 提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品 浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速 应用: 大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换 渗滤(Diafiltration)模式 非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被 去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接, 使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点 集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在**恒定、温和的条件下高效换液。无锡默克2ml超滤浓缩管代理商