糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。上海提供糖原染色试剂盒直销价

染色的一般原则:因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照,进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素 FITC,EGFP激发光:488nm发射光:525nm;使用面较广,价格便宜。PE激发光488nm 发射光575nm,此荧光的激发效率较佳,故此荧光得到的信号较强;检测某些弱表达的抗原,推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm, 发射光660nm,在配有双激光的流式细胞仪上,此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。上海咨询糖原染色试剂盒销售厂家糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。

染色试剂盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因 (β-glucuronidase),是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶。该基因产物为β-葡萄糖苷酸酶,属水解酶类,相当稳定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此这个基因被普遍应用于基因调控的研究中。根据GUS基因检测所用的底物不同,可以选择三种检测方法:组织化学法、分光光度法和荧光法(灵感度为分光光度检测法较高)。其中较为常用的是组织化学法。
注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。腺泡状软组织肉瘤与化感瘤:前者棒状小体糖原染色为阳性。

试剂盒:JC-1是一种阳离子脂质荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-10染料是JC-1染料的升级,有着更很好的水溶性以及染料稳定性。原理:JC-1染料在正常细胞内聚集在线粒体内,形成多聚体,发红色荧光;而在凋亡细胞内,由于线粒体膜电位的破坏,不能聚集到线粒体内,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内。特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质。江苏糖原染色试剂盒直销价
在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸。上海提供糖原染色试剂盒直销价
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:Schiff氏染液的配制是关键,尤其是偏重亚硫酸钠的质量,打开应是粉剂,且带有硫的气味,若成团或没有气味,则不能用,配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现,冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之间),环境温度以不高于20℃为宜,室温高时氧化时间适当缩短;如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长,可使某些物质成分发生非特异反应,使染色结果出现假阳性。因此,室温较高时可适当缩短反应时间。上海提供糖原染色试剂盒直销价
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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2)0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂配制:(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml)20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入2...