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糖类染色实验——糖原染色：高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3～5 min。8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 min。本试剂盒适用于骨髓细胞涂片，血液细胞涂片。提供糖原染色试剂盒生产厂家

PAS染色的临床意义①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed-Sternberg细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性反应，且空泡中心为阴性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，后者呈强阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状或粗颗粒状，有时呈红色块状。白细胞系统：急性淋巴细胞白血病时白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色粗颗粒状或红色块状，底色不红；急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色细颗粒状或呈均匀红色；急性单核细胞白血病时，白血病性原始单核细胞的阳性反应物质呈红色细颗粒状，弥散分布，有时在胞浆的边缘处颗粒较粗大。江西提供糖原染色试剂盒厂家直销自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。

网状纤维染色：网状纤维是非常细而短的纤维，大量堆积时则形成致密的网状，故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少，它多分布在结缔组织与其它组织交界处，如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内，血管周围以及造血部位，内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。网状纤维的变化，反映了疾病的发生和发展的不同过程，对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂，都是病理检验的重要指标，尤其是在临床病理诊断中，可根据其存在和分布来鉴别与肉瘤。而在HE染色标本上，网状纤维不易显色。所以网状纤维的组织化学染色，在临床病理诊断上占着相当重要的位置。

糖原染色（PAS）：（1）原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟，流水冲洗，晾干。滴加雪夫液作用60分钟，流水冲洗，晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟，流水冲洗，晾干镜检。（4）临床意义：根据染色阳性程度和阳性物形态鉴别主要用于急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病鉴别，还有助于红白血病与巨幼细胞贫血和溶血性贫血的鉴别诊断。故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。

注意事项：染色前：①切出的石蜡切片要好，不能有皱褶或者刀痕，切片不能太厚。②捞片时，较好一张玻片捞一个组织，组织较好位于玻片的中间，美观的同时也利于脱蜡（有时二甲苯的液面低于组织片的时候，达不到脱蜡的目的）。③石蜡切片脱蜡到水时，一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底（脱蜡时间不能太少）以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面，在染色时染色液未能充分与组织接触，较终导致染色效果不佳，甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸，以避免脱蜡时把标签纸也浸没，致使标签纸上的胶黏到玻片上，造成染色不佳。特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质。品牌糖原染色试剂盒推荐厂家

一般厚度不超过3mm，大小不超过5×5m㎡。提供糖原染色试剂盒生产厂家

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。提供糖原染色试剂盒生产厂家

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