非特异性条带 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。
SDS可能引起对固定蛋白条带的非特 转膜后，振荡洗涤
异性结合 在操作过程中不使用SDS。
条带扩散 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。
在凝胶上载入过多蛋白 减少蛋白上样量。
黑色印迹，白色条带， 抗体（一抗或二抗）浓度过高 减少抗体浓度，特别是HRP偶联的二抗。
或信号快速减少
免疫沉淀
采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。
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如果吸光度任于1.0，则延长底物的解育时间使用之前应确保所用的试剂已回复至室温（20-28C）。使用不含或含有较任浓度（<0.1%）叠氮化钠、蔬基乙醇或DT的_样温
检查所用约实验稀料度（按照说明书推荐的稀释度进行实验）。检查在产品说明书中该批次的解育时间。（偏底物的前育时间用于20-28℃范围内）;如果吸光系数高于3.0，则缩短底物的第育时间。增加洗海次数，每次洗涤后将液体除净
确认水没有被污染。始终使用重蒸水配制和稀用洗海液。 上海组蛋白抗体抗体咨询报价上海买Sigma抗体哪家靠谱？
叠氮化钠可通过某些偶联方法干扰多种生物实验。因此，进行此类实验时比较好使用离心透析过滤法、透析法或凝胶过滤法除去叠氮化钠，或使用无叠氮化物的抗体。注意：叠氮化钠有毒。对于所有实验室试剂，处理注意事项均请查阅“材料安全性数据表”（MSDS）。抗体为相对稳定的蛋白，能够抵抗较广范围的温和变性条件。当按照生产商的建议条件正确保存时，抗体可保持稳定达数年。
大多数情况下，抗体保存在-20℃时可不损失其结合能力。
比较好避免在无霜冰箱中保存抗体。比较好将其保存于+4℃。抗体上的荧光素较易感光淬灭。因此，荧光结合抗体应在
深色瓶中避光保存。长期保存时，某些抗体溶液可能产生不溶的成分。沉淀物可通过10000 g快速离心去除。
抗体的应用与优化
在19世纪末期，人们认识到了特异性抗体-抗原相互作用的价值，进而多种免疫技术问世，其中大多数目前仍在应用。从分析血液成分的沉淀素试验，到高度特异性的染色质免疫沉淀技术，再到使用自动化成像流式细胞仪上进行的免疫染色实验，以抗体为基础的工具在生物学和生物医学研究中一直起着重要的作用。 有授权的科研抗体公司有哪几家？
利用多肽的不同物理特征，如分子量、电荷和形状，蛋白质复合物可用电泳法（即在凝胶基质上加样并通入电流）分离。以这种方式分离蛋白质的常规方法是SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）。通过“跑胶”，可以了解关于蛋白性质的大量信息；而通过把已
分离的蛋白样品从凝胶转移到固相载体膜上（印迹法）并采用特异性抗体进行检测，可以了解更多信息。在用Western blot检测蛋白时，运用高质量抗体对成功而言是至关重要的。 科研**抗体保证质量-益启生物公司。崇明区Abcam抗体抗体
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流式细鹿分析仪如Guava easyCyte" 8HT仪器采用单细胞的激光激发和荧光及折射光的后续检测，以提供多参数细胞分析。
检测方法
和其它免疫检测应用一样，有几种通过流式细胞术检测特异性细胞的抗体应用方法。主要有三种主要方法∶·直接检测法
直接检测法是指单独一个步骤的染色过程;它采用的荧光分子直标的一抗与目标蛋白特异性结合。
当检测位于细胞表面的抗原时，不推荐进行经奥园定，因为这个过程可能使抗体无法接触目标抗原。因此，必须进行高效工作，以保持未固定细胞存活，直至完成数据获取。这些直标抗体的应用加快了染色过程，因为目标抗原的结合和检测荧光基团标记在同一个步骤中完成。 崇明区Abcam抗体抗体
