不均匀样品，如混浊液、样品中有颗粒节
样品和标准品混匀不亮分移液器加样不准
移液器在样品和/或标准品使用时存在题留
在解育过程中试剂混合不充分洗涤不充分
液体蒸发
稀释倍数的计算不正确修改实验程序样品处理不正确
处理办法：
确保*使用特定批次的试剂进行实验。
检查所用的实验稀释度（按国说明书推荐的稀释度进行实验）检查横孔板分光光度i计中的渡长。
检查在产品说明书中该批次的阐育时间。（酶底物的解育时间用于20-28℃范围内） 益启生物是Sigma抗体的代理商。金山区H3抗体抗体联系人
多克隆抗体通过快速蛋白液相色谱（FPLC）系统纯化，每个色谱柱不得使用超过10次。采用自动化Westernblot确定进一步的纯化程序。
特殊验证
为了支持多步骤、多应用验证流程，我们建立了一个组织和印迹库，其中有高达1300种裂解液，可以准确判断每种抗体的特异性。
质量审查
验证流程的***一个步骤是由一支**的研究员小组进行质量审查。在抗体投入生产前，该小组会对所有抗体验证数据以及来自参与科研者β测试的数据进行评价。如果抗体不符合**严格的质量标准，即使达到了**初的目标，我们也会果断进行废弃处理。 黄浦区Calbiochem抗体抗体咨询问价Upstate抗体的报价具体是多少呢?
问题 可能的原因 处理方法
印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。
印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。
采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。
印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形
采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。
印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。
否正确
Troubleshooting
问题
微珠计数不足
本底过高
微珠不在制定的区域内或圈门中
整个微孔板的信号与本底相同
阳性对照的信号任样品信号过高或饱和
样品信号过低
样品和/或标准品CV值较大
微孔板洗板机吸液高度设置过低微珠混合物配制不当
样品颗粒物或粘度引起干扰
没有正确调整探针高度
本底孔受污染
洗涤不充分
Luminex*器没有正确校准或近期没有校准
没有正确词整门设置
微珠区域设置错误所用样品类型不正确*器没有洗涤或primed
做珠暴露于光下检测不正确或检测不到未加入抗体 上海买Sigma抗体哪家靠谱？
无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发
生蛋白降解
二抗选择错误
曝光时间太短
抗原上样量不足
抗原可能被破坏
检测系统
一抗的亲和力较低
化学发光底物已丧失活性。
已从膜上剥离抗体并再次杂交。
处理方法 使用新转的膜进行实验。
检查是否使用适当的二抗。
增加曝光时间。
在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品，
或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。
检查确保电泳处理未破坏抗原性。
增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。 上海益启订购抗体的服务电话是多少？青浦区标签抗体抗体一级代理
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信号弱
信号高
本底较高
准确度较低（一偶然误差）
计算的教据过高或过任《一系统误差，数据与"标准数据"的偏差）
可能的原因： 实验试剂使用错误实验试剂损坏
所用实验试剂稀释度错误仪器的过滤器选择错误（波长）前育时间过短，温度过低
试剂温度不正确
在较高浓度时，叠氮化钠、燕基乙身或DTT可能干扰过氧化物恃活性。所用实验试剂稀释度错误醇育时间过长，温度过高
洗洛不足洗得污染
试剂或小瓶/试管受到以前实验的污染
所用实验试剂（抗体和等结合物）稀释度错误 金山区H3抗体抗体联系人
