酶联免疫吸附实验(ELISA) 是结合了抗体的特异性和简单髓分析法的高灵敏度蛋白检测方法。通过采用抗体-抗原反应,ELISA可以提供抗原或抗体浓度测量。有两种常用的ELISA形式∶双抗夫心EUSA和竞争性ELISA。图解和描述如下B。 实验中**常用的是双抗夹心ELUSA,它用于测定未知样品中的抗原浓度,是**有用的免疫分析法之一。夹心ELISA 快速且准确;并且如果提供纯化的抗原标准品,该分析法可用于生成剂量-反应曲线,用于测定未知样品中抗源的***量。Abcam抗体的报价具体是多少呢?嘉定区神经抗体抗体销售
对于探索性研究,Western blotting仍是优先平台,是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析
法(如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学)的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间(例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统,目录编
号SNAP2MM),提高了WB实验的效率。
Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤
样本制备
凝胶电泳
转膜
封闭非特异性结合
加入抗体
检测
Western Blot 实验流程图
Troubleshooting
问题 可能的原因 处理方法
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这是为了避免或尽量减少冻融循环。抗体溶液不可反复冻融,因为这可以导致抗体。
聚集,从而引起活性丧失。因此,贮存溶液应在保存前先进行分装。未稀释抗体应在保存于-20℃之前分装,以尽量减少可使抗体变性的反复冻融循环。集中保存抗体可预防或尽量减少降解。可在抗体溶液中加入终浓度为50%的冷冻保护剂,如甘油,以预防冻融造成的损失。请勿将含甘油的抗体保存于-80℃。通常不对酶结合抗体进行冷冻,以免损失酶活性及其结合能力。
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如何选择抗体?
正确选择实验所需抗体可以提高实验成功率,达到事半功倍的效果!
请根据以下注意事项选择您的抗体
确定您研究所需的比较好应用方法
并非所有抗体均可用于每种实验方法。
确定您是在进行定性或定量实验
检查供应商说明书或网站,查看抗体是否适合特定的应用
方法,如WB、ELISA等。
检测样本类型
您的组织或细胞是否表达特殊蛋白?
您是否在尝试检测潜在的或活化的蛋白? 科研**抗体保证质量-益启生物公司。
抗体的使用者可以参考相当***的免疫学知识,但是许多使用者不知道免疫原设计相当复杂,使用免疫原性较低但特异性更强的多肽,对产生高质量抗体很关键。
基于Chemicon®、Upstate®、Millipore®、Calbiochem®和Novagen®等子品牌的强强联合,默克密理博在创新的免疫原设计、免疫、挑选、筛选和验证等方面有着数十年的经验,创造出许多被***使用的抗体,如4G10,Neun,组蛋白修饰等抗体都是相关领域的“金标”抗体。 Calbiochem抗体的报价具体是多少呢?虹口区Merck抗体抗体报价
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在保存抗体时请注意以下几点:
为保持比较大反应性,应按照厂家说明书保存试剂(如,当指定保存温度为2-8℃时,应避免将抗体置于室温下)。保存抗体的经验法则是将其置于非无霜冰箱/制冷机内的严格密封容器中,远离组织固定剂和交联试剂。除非加入稳定蛋白,如BSA(1% w/v),否则抗体不得
在工作液中长期保存。避免长期保存稀释的抗体。保存时遇到的主要问题是细菌或***污染。
如果抗体保存在2-8℃超过2-3天,建议进行过滤除菌和/或加入抑菌剂/防腐剂,如0.05%叠氮化钠或0.1%硫柳汞。 嘉定区神经抗体抗体销售