对于成功的ChIP实验，选择适当的ChIP抗体是**关键的步骤之一。即使是比较高质量的抗体，即在经典的Western blot验证中表现非常好的抗体，也不一定适合ChIP。比较好只考虑使用在ChIP实验中专门验证过的抗体。一般的， ChIP实验之后会用定量PCR（qPCR）来验证某一特定DNA序列是否与靶蛋白有关。研究人员可以采用这种经典方法评估目标蛋白与已知的靶基因之间的相互作用。
ChIP实验可以细分为以下几个主要步骤：
样品制备
蛋白与DNA交联
细胞裂解和染色质片段化
染色质免疫沉淀 科研**抗体保证质量-益启生物公司。标签抗体抗体代理价
对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析
法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编
号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。
Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤
样本制备
凝胶电泳
转膜
封闭非特异性结合
加入抗体
检测
Western Blot 实验流程图
Troubleshooting
问题 可能的原因 处理方法
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未加入链零亲和素-藻红蛋白前育温度、时间或需荡不适当校准目标值设置过高
对照物和样品在微孔板上解育时间过长样品中含有的分析物流度高于分析动态范围
样品不含分析物或所含分析物任于可检测水平
多道移液器可能没有校准微孔板洗涤不均匀
样品可能含有较高水平的颗粒物或其它干扰性物质微孔板振荡不足
孔间交叉污染
根据生产厂家说明书调整吸液高度，超声处理模珠小眶，涡旋，然后根据方案立即加到微珠是合小瓶中。间教性理动在题中的微珠混合物，同时用移液器移取到微孔板上。上样探计也可能需要用精冲、反冲洗和洗海等方法清洁;或如有需要，应取下保计并超声处理。
在阴性对照（igG或mockIP）样品中本底较高
抗体过量导致抗体与非靶蛋白结合∶
与珠子的非特异性结合∶
染色质的不完金裂解∶
试剂污染∶
"无DNA" PCR反应显示信号
DNA的较低回收率
ChIP抗体无效或较低亲和力：
ChIP抗体不足：
起始样品不足：
细胞不完全溶解和无效裂解：
交联过度：
交联不足：
亲和力较低或珠子质量较差：
PCR引物：
优化抗体的浓度。
加入-个残***步理，以除这些非特异性蛋白或添加珠子的阻断剂。
优化取解过程，以民得介于200-100bp长度的染色质。 Sigma抗体零售多少钱呢？
请查测生产厂家说明书。当在Luminex200仪器上读取分析的读数时，采用4个校准片，根题Luminex推荐的方案调整探针高度至适当位置。当在FLEX0MP3D"仪器上读取分析法的读数时，采用1个校准片，根据Luminex建议的方案调整探针高度至适当位置。当在MAGPK"系统上读取分析的读数时，采用2个校准片，根掘山uminex建议的方案调整探针高度至适当位置。
适当使用封闭剂，且用多道移液器移取液体而不触碰微孔板中的试剂，这样可以遍免孔的交叉污染。增加洗涤次数 上海益启生物的联系电话。徐汇区Abcam抗体抗体代理价格
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如果实验试剂将用于进一步测量，应避免直接使用移液管从试剂瓶中移取。（氧化活性污采物可通过非特异性显色影响费底物），检查所用抗体和陶结合物的实验验稀释度
检查确保样品根据建议的样品操作抽提、配制和贮菱（聚丙烯试管，澄清样品的贮载温度为-20℃）。配置样品和标准 品时究分程匀检查您的移液器，必要时进行校准。在每次移液器移取后更换移液器吸头。加样后，充分震荡微孔板，使试剂混匀
检查自动微孔板洗板机能正常工作;在每个洗涤步骤后，必须完全除去残留液体。 标签抗体抗体代理价
上海益启生物科技有限公司致力于化工，以科技创新实现***管理的追求。公司自创立以来，投身于试剂，耗材，科研试剂，仪器设备，是化工的主力军。益启生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念，影响并带动团队取得成功。益启生物始终关注自身，在风云变化的时代，对自身的建设毫不懈怠，高度的专注与执着使益启生物在行业的从容而自信。
