未加入链零亲和素-藻红蛋白前育温度、时间或需荡不适当校准目标值设置过高
对照物和样品在微孔板上解育时间过长样品中含有的分析物流度高于分析动态范围
样品不含分析物或所含分析物任于可检测水平
多道移液器可能没有校准微孔板洗涤不均匀
样品可能含有较高水平的颗粒物或其它干扰性物质微孔板振荡不足
孔间交叉污染
根据生产厂家说明书调整吸液高度，超声处理模珠小眶，涡旋，然后根据方案立即加到微珠是合小瓶中。间教性理动在题中的微珠混合物，同时用移液器移取到微孔板上。上样探计也可能需要用精冲、反冲洗和洗海等方法清洁;或如有需要，应取下保计并超声处理。 上海益启品牌抗体规格。虹口区鉴定抗体抗体哪家优惠
对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析
法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编
号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。
Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤
样本制备
凝胶电泳
转膜
封闭非特异性结合
加入抗体
检测
Western Blot 实验流程图
Troubleshooting
问题 可能的原因 处理方法
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成功的IHC实验取决于高质量抗体选择和合遇的实验浓度。每一种抗体都要根据实际的实验情况进行优化。即使是同一反应体系，针对不同的抗体适合的稀释浓度也是不同的。实验者可以以说明书上推荐的稀释倍数作为参考。
SNAPi.d.⑧2.0IHC加速器带来的主要改进·直观的设计，将封闭、洗涤、抗体孵育及标记等步骤结合起来· 不需要使用石蜡笔·抗体可以收集后继续使用
·切片操作的时间大幅减少，洗涤步骤耗时大幅减少，可同时操作多达24涨切片，
ChHPAb+trimethy-istione H3Lys917625）∶使用免gG 或AntrimethyHhistone H3Lys9抗体，与Magna ChIP 试剂盒17-610）一起将超声处理后的NH3T3 L1组胞染色质进行染色质免疫沉淀反应。对获取的trimethy-histone H3ILys9DNA精合片段进行qPCR确认，使用的引物为屋p16启动子附近序列。
染色质免疫共沉淀∶相关产品
磁珠
**与ChIP实验的A，G，或A/G蛋白Magna ChIP磁珠经过严格优化，用于ChIP实验中收集沉淀复合物，具有速度快，重复性好，效率高的优点。与常规琼脂糖微珠不同，在反应中，Magna ChIP 磁珠可在磁场作用下快速移动至反应器边缘，***降低免疫沉淀复合物的滞留时间和机械压力。 益启生物是Merck抗体的代理商。
无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发
生蛋白降解
二抗选择错误
曝光时间太短
抗原上样量不足
抗原可能被破坏
检测系统
一抗的亲和力较低
化学发光底物已丧失活性。
已从膜上剥离抗体并再次杂交。
处理方法 使用新转的膜进行实验。
检查是否使用适当的二抗。
增加曝光时间。
在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品，
或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。
检查确保电泳处理未破坏抗原性。
增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。 WB抗体的报价具体是多少呢?浦东新区MYC抗体抗体代理价
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免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP))
免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。 虹口区鉴定抗体抗体哪家优惠
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