福建如何使用糖原染色试剂盒

糖原染色正常值:正常情况下，红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。糖原染色临床意义:(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等，幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。(2)帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞，巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。(3)帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。福建如何使用糖原染色试剂盒

染色试剂盒：GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因 (β-glucuronidase)，是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶。该基因产物为β-葡萄糖苷酸酶，属水解酶类，相当稳定而不易降解，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被普遍应用于基因调控的研究中。根据GUS基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法较高）。其中较为常用的是组织化学法。江苏品质好的糖原染色试剂盒单价冷冻切片染色时间尽量要短。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：Schiff氏染液的配制是关键，尤其是偏重亚硫酸钠的质量，打开应是粉剂，且带有硫的气味，若成团或没有气味，则不能用，配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1]，配好后可分成小份置于-20℃保存，用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现，冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5％～1％高碘酸（pH值在3.0～5.0之间），环境温度以不高于20℃为宜，室温高时氧化时间适当缩短；如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长，可使某些物质成分发生非特异反应，使染色结果出现假阳性。因此，室温较高时可适当缩短反应时间。

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。将动物杀死后迅速取出所需要的组织。

注意事项：染色前：①切出的石蜡切片要好，不能有皱褶或者刀痕，切片不能太厚。②捞片时，较好一张玻片捞一个组织，组织较好位于玻片的中间，美观的同时也利于脱蜡（有时二甲苯的液面低于组织片的时候，达不到脱蜡的目的）。③石蜡切片脱蜡到水时，一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底（脱蜡时间不能太少）以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面，在染色时染色液未能充分与组织接触，较终导致染色效果不佳，甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸，以避免脱蜡时把标签纸也浸没，致使标签纸上的胶黏到玻片上，造成染色不佳。在滴加染液时，务必使染液完全覆盖组织，但不能溢出圈外，避免浪费试剂。江西提供糖原染色试剂盒量大从优

故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。福建如何使用糖原染色试剂盒

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