南通MicroDrop-100数字PCR

       数字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近几年发展起来的一种核酸定量分析技术。相较于传统荧光定量PCR来说，数字PCR对结果的判定不依赖于扩增曲线循环Ct值，不受扩增效率的影响，能够直接读出DNA的分子个数，能够对起始样本核酸分子***定量。

       数字PCR基本原理是将一个样本分成几十到几万份，然后再将其分配到不同的反应单元中，使每个微滴单元包含一个或多个拷贝的核酸分子（即DNA模板），每个单元都会对目标分子进行扩增，然后再对每个单元进行荧光信号的统计并计算。相对而言，传统PCR或qPCR反应都是发生于同一体系当中，这也是数字PCR与其比较大的区别。 适用复杂样品的检测。南通MicroDrop-100数字PCR

研究方向

无创产前筛查

       无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地贫检测或已知父母基因型的其它核酸病检测(孟德尔相关遗传疾病)。目前标本来源主要为血液，而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰，影响了检测的准确性。而QX200检测系统独特的微滴化技术完全可以作为二代测序法的补充来进行的无创伤产前诊断，从而提高工作效率及节约成本。

转基因食品或成分的检测

       目前在确定转基因作物或成分的含量时采取定量PCR的标准曲线法，这种方法需要依赖于已知浓度的标准品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以彻底解决这些标准物质的定标工作。 北京广州永诺数字PCR哪家好MicroDrop™数字PCR可广泛应用于科研、医疗、出入境检验检疫等领域。

研究方向

低丰度及稀有序列的精确定量

目前对于低丰度目标序列的检测，定量PCR、杂交、毛细管测序及NGS等方法都因受到背景DNA的干扰，使得检测灵敏度及精确性都达不到精细定量的要求(如定量PCR检测中Ct值大于33的情况下，其重复性就不是很高)， 而微滴式数字PCR系统通过**的微滴化处理，使得稀有的核酸序列从大量的背景DNA中分离出来，从而提高了检测的灵敏度及重复性。

此外，由于样品微滴化处理的同时，也将样品中可能存在的***剂进行了分装，提高了数字PCR扩增对于***剂的耐受程度，因此可具体应用于很多临床样品(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液等)中对**核酸标记物的检测。一般而言，毛细管电泳和定量PCR的检测灵敏度约在10%;NGS的灵敏度可达到1%;而ddPCR的检测下限为0.001%。

与常规PCR方法相比，数字PCR有如下优势：

1、能够***定量：常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线，但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系，条件上会存在差异，另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响，可进行***定量。

2、样本需求量低：适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本。

3、灵敏度高：数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应，这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。

4、高耐受性：由于目的序列被分配到多个**反应体系中，***降低了背景信号和***物对反应的干扰，扩增基质效应大大减小。 MicroDrop™数字PCR是拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪。

       MicroDrop-100微滴式数字PCR是具有国内自主知识产权的第三代JUE对定量PCR系统，整套系统由MicroDrop-100A微滴生成仪、 MicroDrop-100B微滴检测仪以及结果数据分析设备等构成。系统通过自主设计的微流控芯片，利用油水相不兼容的原理，在2分钟时间内将PCR体系分割成100,000油包水的体系，每个体系为**的PCR反应体系，体积约为0.2nL，单次实验一次可生成8个样本的油包水体系。由于油包水体系的分割效应，使得数字PCR受PCRYi制物的影响相对较小，有利于复杂环境样本的实验操作。区别于荧光定量PCR的过程性判读方法，数字PCR结果判读为终点法，故其对PCR扩增效率的依赖也相对较小。  不依赖Ct值，无需标准曲线。北京广东数字PCR品牌

采用有限稀释的方法将目标分子分割到**的反应体系中。南通MicroDrop-100数字PCR

       微滴式数字PCR系统在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。

与传统PCR相比所具有的优势

       不依赖Ct值或内参基因，即可确定低至单拷贝的待检靶分子的***数目。微滴技术让数字PCR更低成本，且更实用。

南通MicroDrop-100数字PCR