外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。
默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎? 超滤浓缩管服务电话是多少呢。静安区Merck超滤浓缩管报价
Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作
6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 嘉定区Merck超滤浓缩管咨询报价那么 超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢?
膜的吸附损失
对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外
要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损
失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再
生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管
等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的
吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就
应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选
用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列
离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向
流系统,支持您获得理想的处理效果。
高通量超滤
MultiScreen®超滤膜板
MultiScreen® 超滤膜板是实现高通量生物样品处理的必备工具,能配合自动化工作平台对样品进行纯化、浓缩、脱盐或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 种带有低吸附超滤膜的 96 孔板,在高通量操作时样品吸附损失小而得率高。
优点与应用:
高通量:96 孔超滤膜板和 384 孔膜板
可靠:低蛋白吸附,蛋白得率高,孔间数据均一性好
功能多样:样品体积 50-500μL 适用,兼容各种 96/384 孔板标准操作设备或自动化平台
用于高通量蛋白鉴定与筛选的浓缩、脱盐,以及样品分析前大分子蛋白去除
也可用于核酸(DNA/RNA/PCR 产物 / ***)样品制备及二代测序样品制备 超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。
对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关***)的制备方法供参考。
去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration, CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果。
Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。 上海超滤浓缩管供应商。虹口区Merck离心浓缩管代理商
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蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩)
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
3次低速离心,总耗时~75分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂(沉降的柱床体积)和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。(柱床)树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。
2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*,其间可温和搅动促进结合。 静安区Merck超滤浓缩管报价
上海益启生物科技有限公司是一家 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。的公司,致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。益启生物作为 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。的企业之一,为客户提供良好的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备。益启生物致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心,为用户带来良好体验。益启生物始终关注自身,在风云变化的时代,对自身的建设毫不懈怠,高度的专注与执着使益启生物在行业的从容而自信。