截留
截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近
的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强
度改变的情况下倾向于聚集或改变构象，因此其有效大小可能比 “天然”
分子大恨多，从而导致排阻增加。比如，有些蛋白质在某些缓冲液条件下
会发生多聚化，而另一些则发生解聚（如血红素蛋白）成亚基。这使选择
合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验，我们通常推荐选择
为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先，再根据实际情况加以调整。 超滤浓缩管服务电话是多少呢。上海默克2ml超滤浓缩管代理商
离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”，操作时样品首先被浓缩，继而加入新的溶液，再次浓缩时，原溶液已经被换成选定的溶液。
化学相容性与溶出
样品的化学背景有时很多样而复杂，过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质，但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括：• 标称分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）• 截留 • 浓差极化 • 通量 闵行区Merck超滤浓缩管代理价上海超滤浓缩管代理销售哪家好？
特点与优点：
特别的反转离心回收设计，滞留体积很小，样品损失少，
样品回收率通常>90%
浓缩倍数达到50-200倍
Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低
特别设计的死体积防止离干，保证样品回收率和活性
有四种截留分子量供选择
法医gDNA鉴定、PCR产物纯化与小分子分离
Microcon® 超滤管
Microcon®为横膜式超滤管，没有死体积，用于大分子样品的浓缩、脱
盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分
离，比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。 上海超滤浓缩管销售公司电话多少？
脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心，总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。
4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
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无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。
有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。
研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。
样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 上海默克2ml超滤浓缩管代理商
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