蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过
20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降为推荐离心力的30%-50%
2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩
Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。 上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?普陀区离心浓缩管代理价格
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。
7. 4,000×g离心15 min。
8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
用Protein A或G对抗体进行亲和纯化 浦东新区默克超滤浓缩管商家超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(达 **分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。
特别推荐应用(提供实验报告作为参考)
Microcon®超滤管:
Microcon®PCR 级超滤管:
• 法医鉴定分析的DNA样品制备
• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换
• 体外合成mRNA的纯化
• 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针
• 游离标记物的去除
• 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究
• 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA
应用指南
典型应用
肽及生长因子浓缩
蛋白浓缩与脱盐
电泳等操作前的蛋白样品浓缩
HPLC前去除蛋白
组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化
生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等)
从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA
核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸)
去除标记核苷酸
去除标记氨基酸
从扩增的DNA产物中去除引物
克隆前去除连接序列(linker) 超滤浓缩管的优点有很多。
特点与优点
温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性
所有型号都可以高压灭菌
提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品
浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速
应用:
大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换
渗滤(Diafiltration)模式
非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被
去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,
使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点
集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在**恒定、温和的条件下高效换液。 超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。闵行区Merck超滤浓缩管代理价格
超滤浓缩管的好处有很多。普陀区离心浓缩管代理价格
首先,Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因:
1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查:
a)是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?
b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方法请垂询。
c)离心机**近是否有校准过?
d)是否***尝试这个蛋白? 普陀区离心浓缩管代理价格
上海益启生物科技有限公司一直专注于 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。,是一家化工的企业,拥有自己**的技术体系。公司目前拥有较多的高技术人才,以不断增强企业重点竞争力,加快企业技术创新,实现稳健生产经营。上海益启生物科技有限公司主营业务涵盖试剂,耗材,科研试剂,仪器设备,坚持“质量保证、良好服务、顾客满意”的质量方针,赢得广大客户的支持和信赖。公司凭着雄厚的技术力量、饱满的工作态度、扎实的工作作风、良好的职业道德,树立了良好的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备形象,赢得了社会各界的信任和认可。