脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心,总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做:加入1.5 mL用于置换的缓冲液,1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
4. 加入1.5 mL样品,4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液,4,000×g离心15 min,换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时,可以适当延长离心时间,也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
查看详细信息。 超滤浓缩管的系列有很多。松江区离心浓缩管一级代理
Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作
6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 嘉定区默克超滤浓缩管一级代理益启生物公司专业致力于 超滤浓缩管代理销售。
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
***的化学兼容性
•膜与管壁采用特别的热封工艺,避免使用胶水
带来的化学溶出对样品的污染
•Ultracel® 超滤膜和聚丙烯管材性能稳定,化学
兼容性好
•pH3-10 适用
特别推荐应用(提供实验报告作为参考)
Amicon® Ultra 离心超滤管:
• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换
• 尿液中蛋白质的浓缩
• 游离标记物的去除
• 抗体的快速浓缩
• 血清多肽生物标志物的纯化
• 双向电泳蛋白样品制备
• 样品去垢剂的去除
操作更安心
•设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即
使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作
•性能稳定,数据平行性、重现性好,适合精细操作和
高通量操作 超滤浓缩管的主要优势是什么。
7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 Millipore超滤浓缩管用于蛋白超滤、浓缩、除盐!无锡浓缩管联系方式
益启生物公司的 超滤浓缩管系列有很多。松江区离心浓缩管一级代理
大体积样品浓缩
Centricon® Plus-70离心浓缩装置
用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL;死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同,样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计,加快处理速度;反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法,是非常方便的工具。
特别推荐的应用:
色谱洗脱产物的浓缩和脱盐
单克隆抗体浓缩
培养上清中蛋白和***的浓缩
组织匀浆液和细胞裂解液澄清 松江区离心浓缩管一级代理
上海益启生物科技有限公司专注技术创新和产品研发,发展规模团队不断壮大。公司目前拥有专业的技术员工,为员工提供广阔的发展平台与成长空间,为客户提供高质的产品服务,深受员工与客户好评。诚实、守信是对企业的经营要求,也是我们做人的基本准则。公司致力于打造***的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备。公司凭着雄厚的技术力量、饱满的工作态度、扎实的工作作风、良好的职业道德,树立了良好的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备形象,赢得了社会各界的信任和认可。