膜的吸附损失
对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外
要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损
失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再
生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管
等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的
吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就
应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选
用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列
离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向
流系统,支持您获得理想的处理效果。 超滤浓缩管的好处都有很多。默克超滤浓缩管批发
Amicon® Ultra 4 mL 超滤管
-离心速度快而保持很高的回收率
4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon®
Ultra 4mL 超滤管中浓缩(3kDa 细胞色素 C,
10kDa 细胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG),
测定在离心一定时间后的回收率。数据显
示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均
>95%。
为了方便初次使用者选择**合适的超
滤管产品,默克密理博生命科学部网
站上提供选择指引,您只需要按照提
示进行选择,**终会选出一款产品。
为每次实验选择**合适的,
您也能快速成为超滤高手! 崇明区默克15ml超滤浓缩管联系电话上海超滤浓缩管哪家比较好?
截留
截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近
的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强
度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然”
分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下
会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择
合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择
为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。
抗体标记
适合25-200μg样品操作
5次低速离心,总耗时~50分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 加入抗体样品
• 对于比较稀释的样品(< 1 mg/mL)
- 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(建议使用50k MWCO)。
- 加上至多1 mL抗体样品, 4,000×g离心15 min。
• 对于浓度较高的的样品(≥ 1 mg/mL)
- 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(建议使用50k MWCO)中加入至多100μL样品。
- 将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。
3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。
4. 4,000×g离心15 min。
5. 优化选做:将样品在室温下多孵育30 min。
6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。
7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。
8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 你知道超滤浓缩管的用途吗?
操作模式
常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流
过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常
用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF)
液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表
面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离
的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF
技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩
和分离操作也变得更加方便。 超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢?无锡浓缩管哪家好
超滤浓缩管具体报价多少呢。默克超滤浓缩管批发
经典离心浓缩装置
Amicon® Ultra 离心超滤管
反转离心回收
•反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品高效
回收,避免***头吸取造成的样品丢失或操作错误
•0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式
样品吸附损失小
•Ultracel® 超滤膜为密理博超滤产品特有的设
计,非特异吸附比较低,减少样品的吸附损失
•膜和聚丙烯管都是低吸附材质,保证> 90%
回收率
•竖膜切向流设计,不像横膜那样容易堵,样品
损失少
•浓缩速度超快,**少*需 10 分钟
默克超滤浓缩管批发
上海益启生物科技有限公司专注技术创新和产品研发,发展规模团队不断壮大。公司目前拥有较多的高技术人才,以不断增强企业重点竞争力,加快企业技术创新,实现稳健生产经营。公司以诚信为本,业务领域涵盖试剂,耗材,科研试剂,仪器设备,我们本着对客户负责,对员工负责,更是对公司发展负责的态度,争取做到让每位客户满意。一直以来公司坚持以客户为中心、试剂,耗材,科研试剂,仪器设备市场为导向,重信誉,保质量,想客户之所想,急用户之所急,全力以赴满足客户的一切需要。