创新的纯化 - 浓缩 - 换液一体化系统
Amicon® Pro 纯化超滤系统
目前的蛋白纯化常常包括很多步骤,用到多种器具,却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险,减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间,默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作,使纯化浓缩蛋白变得简便高效,数据稳定易得。
开放的设计使您可以根据实际需要灵活使用,Amicon®Pro将成为实验室小量蛋白纯化、浓缩、换液各种操作的多功能工具。 Millipore超滤浓缩管用于蛋白超滤、浓缩、除盐!普陀区默克4ml超滤浓缩管联系电话
操作模式
常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流
过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常
用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF)
液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表
面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离
的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF
技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩
和分离操作也变得更加方便。 静安区默克2ml超滤浓缩管报价超滤浓缩管的主要优势是什么。
蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩)
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
3次低速离心,总耗时~75分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂(沉降的柱床体积)和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。(柱床)树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。
2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*,其间可温和搅动促进结合。
离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。
化学相容性与溶出
样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量 根据您的具体需求选择不同的 超滤浓缩管设计。
蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过
20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降为推荐离心力的30%-50%
2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩
Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。 超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。上海默克离心浓缩管联系人
对于不同的需求我们选择不同的 超滤浓缩管系列。普陀区默克4ml超滤浓缩管联系电话
用于搅拌式超滤杯的Ultracel®预切超滤膜片
Ultracel® 再生纤维素膜可以用来对较为稀释的溶液进行脱盐或浓缩。Ultracel® 膜是亲水性的,微观结构紧密,确保对蛋白、核酸等大分子吸附比较低而回收率比较高。
*膜的常规截留分子量分为1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。
*膜片直径分为25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。
对于大体积、高浓度(如蛋白浓度大于 1.0 mg/mL)的样品进行脱盐和浓缩,Biomax®聚苯醚砜(PES)超滤膜是很好的选择。血清、血浆或条件组织培养基等,都是 Biomax®超滤膜适合处理的样品。
*膜的常规截留分子量为5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。
*膜直径分为25,44.5,47,63.5和76mm。 普陀区默克4ml超滤浓缩管联系电话
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