无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。
有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。
研究者可根据样品的粘稠程度,以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便达到更好的得率和操作体验。
样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管,请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度,可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 根据您的具体需求选择不同的 超滤浓缩管设计。虹口区默克超滤浓缩管参数
超滤(UF)常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响,这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa(MW)的分子,盐和水等小分子会透过,因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径,则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径,膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和,没有发生容易导致生物大分子失活的相变,而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作,也常用于核酸样品制备,包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩,回收率达到99%以上。浦东新区默克0.5ml超滤浓缩管哪家优惠一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您了解吗?
膜的吸附损失
对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外
要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损
失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再
生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管
等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的
吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就
应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选
用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列
离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向
流系统,支持您获得理想的处理效果。
特点与优点
温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性
所有型号都可以高压灭菌
提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品
浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速
应用:
大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换
渗滤(Diafiltration)模式
非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被
去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,
使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点
集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在**恒定、温和的条件下高效换液。 超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。
7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 超滤浓缩管的好处都有很多。江苏Millipore超滤浓缩管批发
上海 超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。虹口区默克超滤浓缩管参数
Centrifree®过滤器
Centrifree® 过滤器拥有研究及体外诊断证书(美国适用),是为临床研究实验室的样品制备而设计的,能够快速、高效地通过超滤去除小体积(0.15–1.0 mL)血清、血浆等生物样品中的蛋白未结合的小分子溶质。数分钟之内完成精确的分离,样品终体积约为 10μL;不会发生样品稀释、pH 值变化、离子成分变化或未结合小分子溶质浓缩等情况。这种产品使用的是低吸附的再生纤维素膜,亲水膜和 O 型圈,不含增塑剂,确保获得较好的样品回收效果。
优点与应用:
分离血清、血浆等生物学样品中未
吸附的小分子物质
精确的药物结合实验样品制备**
去除生物样品中的蛋白质等大分子
的干扰,减少样品复杂性
测 定 游 离 型 *** 药 物、睾 丸 ***、
甲 状 腺 素 等,用 于 生 物 活 性 研 究、
药物结合分析等新药评估过程 虹口区默克超滤浓缩管参数
上海益启生物科技有限公司是一家贸易型类企业,积极探索行业发展,努力实现产品创新。益启生物是一家私营合伙企业企业,一直“以人为本,服务于社会”的经营理念;“诚守信誉,持续发展”的质量方针。以满足顾客要求为己任;以顾客永远满意为标准;以保持行业优先为目标,提供***的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备。益启生物将以真诚的服务、创新的理念、***的产品,为彼此赢得全新的未来!