经典离心浓缩装置
Amicon® Ultra 离心超滤管
反转离心回收
•反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品高效
回收,避免***头吸取造成的样品丢失或操作错误
•0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式
样品吸附损失小
•Ultracel® 超滤膜为密理博超滤产品特有的设
计,非特异吸附比较低,减少样品的吸附损失
•膜和聚丙烯管都是低吸附材质,保证> 90%
回收率
•竖膜切向流设计,不像横膜那样容易堵,样品
损失少
•浓缩速度超快,**少*需 10 分钟
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用超滤对分子进行分级
通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去
除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过
的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截
留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜,
75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的
溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实
践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍
以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的
分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。 江苏Millipore超滤浓缩管商家上海超滤浓缩管批发商。
蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过
20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降为推荐离心力的30%-50%
2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩
Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。
用于搅拌式超滤杯的Ultracel®预切超滤膜片
Ultracel® 再生纤维素膜可以用来对较为稀释的溶液进行脱盐或浓缩。Ultracel® 膜是亲水性的,微观结构紧密,确保对蛋白、核酸等大分子吸附比较低而回收率比较高。
*膜的常规截留分子量分为1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。
*膜片直径分为25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。
对于大体积、高浓度(如蛋白浓度大于 1.0 mg/mL)的样品进行脱盐和浓缩,Biomax®聚苯醚砜(PES)超滤膜是很好的选择。血清、血浆或条件组织培养基等,都是 Biomax®超滤膜适合处理的样品。
*膜的常规截留分子量为5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。
*膜直径分为25,44.5,47,63.5和76mm。 益启生物公司主营 超滤浓缩管销售。
离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。
化学相容性与溶出
样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量 上海Millipore超滤浓缩管授权代理商!嘉定区默克2ml超滤浓缩管代理商
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如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 静安区Merck超滤浓缩管报价
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