脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心,总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做:加入1.5 mL用于置换的缓冲液,1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
4. 加入1.5 mL样品,4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液,4,000×g离心15 min,换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时,可以适当延长离心时间,也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
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样品的澄清、过滤和除菌
Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管
Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。
特点与优点
有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择
采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜
提供无菌包装和非无菌包装形式产品
过滤速度快,数据稳定、重现性好
上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)
配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用
顶盖颜色标识易于区分膜孔径 普陀区默克0.5ml超滤浓缩管订购超滤浓缩管的好处有很多。
这是一种只用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。
为了与下游应用兼容,常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长,多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活,而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新,只需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。
Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准
操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果,数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改
善,默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体,减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差,使蛋白样品的处理更加标准化,数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。
这种小管适合在1.5mL离心机中使用,其Ultracel®超滤膜对于蛋白及其它成分都表现出
极低的非特异性结合,连同医药级O型圈封闭设计,确保更少的样品丢失,更稳定的数据结果。诸多考虑周到的精细设计使Microcon®成为比较好用的样品制备工具之一。
特点与优点:
低吸附膜和反转回收设计,即使是小体积、低浓度样品得率也能达到95%以上
可以用产品自带的1.5mL样品收集管存储滤过液和浓缩产物
浓缩倍数可达100X
操作简便快捷,易于标准化。
Microcon® DNA Fast Flow 超滤管
专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质,医用级O型圈密封,保证了在洗涤步骤中样品丢失**少。反转回收设计,即使样品量很小也能获得理想的得率,浓缩倍数可以达到20X。 超滤浓缩管的优缺点您知道吗?
蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过
20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降为推荐离心力的30%-50%
2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩
Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。 超滤浓缩管的系列有很多。默克4ml超滤浓缩管销售
你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?普陀区默克0.5ml超滤浓缩管订购
***的化学兼容性
•膜与管壁采用特别的热封工艺,避免使用胶水
带来的化学溶出对样品的污染
•Ultracel® 超滤膜和聚丙烯管材性能稳定,化学
兼容性好
•pH3-10 适用
特别推荐应用(提供实验报告作为参考)
Amicon® Ultra 离心超滤管:
• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换
• 尿液中蛋白质的浓缩
• 游离标记物的去除
• 抗体的快速浓缩
• 血清多肽生物标志物的纯化
• 双向电泳蛋白样品制备
• 样品去垢剂的去除
操作更安心
•设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即
使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作
•性能稳定,数据平行性、重现性好,适合精细操作和
高通量操作 普陀区默克0.5ml超滤浓缩管订购
上海益启生物科技有限公司致力于化工,是一家贸易型的公司。公司业务分为试剂,耗材,科研试剂,仪器设备等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供良好的产品和服务。公司从事化工多年,有着创新的设计、强大的技术,还有一批**的专业化的队伍,确保为客户提供良好的产品及服务。益启生物立足于全国市场,依托强大的研发实力,融合前沿的技术理念,飞快响应客户的变化需求。