用超滤对分子进行分级
通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去
除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过
的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截
留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜，
75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的
溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实
践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍
以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的
分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。 益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。江苏Merck超滤浓缩管咨询问价
膜的吸附损失
对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外
要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损
失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel® 再
生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小，是 Amicon® Ultra 超滤管
等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的
吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就
应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选
用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列
离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向
流系统，支持您获得理想的处理效果。 南京默克15ml超滤浓缩管订购上海超滤浓缩管代理销售电话多少？
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。
通量（超滤效率）及其影响因素
超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的
通量的定义是流量除以面积，使用高 NMWL 滤膜可以增加通量，但同时
会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参
与影响通量的因素很多，包括：
压力：较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时，流量随着跨膜压力
（TMP）的增大而增加。正压条件下操作，如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯，
这种因素影响较为明显。如果极化影响***，通量会达到一个平台，甚
至可能随着压力的增加而降低。 您知道益启生物公司的 超滤浓缩管系列都有哪些吗？
核苷酸截留分子量（NCO）
超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸
和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏
过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择
滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。
浓差极化
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞，产生除了膜本身截留分
子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时，会形成相当于第二层滤膜作
用的胶体层，干扰分子通过滤膜，同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分
也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢？江苏离心浓缩管咨询问价益启生物公司作为上海一家专业从事 超滤浓缩管代理销售。江苏Merck超滤浓缩管咨询问价
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。
有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。
研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。
样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 江苏Merck超滤浓缩管咨询问价
上海益启生物科技有限公司是一家 从事生物科技（除生物试剂）领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让；室内外装潢；建筑工程设计与施工；展览展示服务；计算机及配件、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品）实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。的公司，致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。益启生物拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队，以高度的专注和执着为客户提供试剂，耗材，科研试剂，仪器设备。益启生物致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心，为用户带来良好体验。益启生物始终关注化工市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。
