企业商机
数字PCR基本参数
  • 产地
  • 中国
  • 品牌
  • 永诺
  • 型号
  • MicroDrop-100
  • 是否定制
数字PCR企业商机

研究方向

低丰度及稀有序列的精确定量

目前对于低丰度目标序列的检测,定量PCR、杂交、毛细管测序及NGS等方法都因受到背景DNA的干扰,使得检测灵敏度及精确性都达不到精细定量的要求(如定量PCR检测中Ct值大于33的情况下,其重复性就不是很高), 而微滴式数字PCR系统通过**的微滴化处理,使得稀有的核酸序列从大量的背景DNA中分离出来,从而提高了检测的灵敏度及重复性。

此外,由于样品微滴化处理的同时,也将样品中可能存在的***剂进行了分装,提高了数字PCR扩增对于***剂的耐受程度,因此可具体应用于很多临床样品(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液等)中对**核酸标记物的检测。一般而言,毛细管电泳和定量PCR的检测灵敏度约在10%;NGS的灵敏度可达到1%;而ddPCR的检测下限为0.001%。 理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用。杭州微流控芯片数字PCR价格

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        精细诊断是精细医学的关键环节,液体活检作为一种无创、均一的检测技术,迅速成为精细诊断领域的新星,2015年被《麻省理工大学科技评论》评选为年度**突破技术, 2017年入选世界经济论坛评出的全球**新兴技术,引发了全球科研、临床和产业界的极大热情,已在**、产前诊断、***移植等疾病领域***被应用。

        数字PCR技术与高通量的二代测序技术,共同组成液体活检领域的两大利器;数字PCR技术是公认的液体活检领域灵敏度比较高的检测方法,采用有限稀释的方法将目标分子分割到**的反应体系中,在不依赖标准曲线条件下实现靶标***定量检测,能检测低至0.01%的突变基因;Bio-Rad及Thermo Fisher目前是这一领域的主导者,分别采用微滴或芯片方式将样本分割成两万份,MiniDrop™创新性采用高压驱动的方法将样本分割成50万份,打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断


MicroDrop-100数字PCR代理商永诺生物MicroDrop-100微滴式数字PCR仪**行业的10万个微滴数,保证泊松分布所需要的充分的样本量。

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每种PCR方法对比如下:

数字PCR

实时荧光定量PCR

传统PCR

概述

测量阴性平行样的比例以确定***拷贝数

在发生PCR扩增时进行测量

在PCR循环结束时测量积聚的PCR产物的量

是否定量

是,阴性PCR反应的比例适合泊松统计算法

是,因为在PCR的指数期内采集数据,在此期间PCR产物的数量与核酸模板量成正比

否,但是比较凝胶上的扩增条带的强度与已知浓度的标准品可进行半定量

应用

***载体***定量

核酸标准品***定量

下一代测序文库***定量

稀有等位基因检测

基因表达***定量

混合物富集和分类

基因表达定量

质量控制和检测验证

病原体检测

SNP基因分型

拷贝数变异

microRNA分析

***定量

siRNA/RNAi实验

DNA扩增

基因分型

分子克隆

MicroDrop-100系统产品特点

一、适应性广,灵活性高

1理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用

2样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定

3开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。

 

二、灵敏度高,准确性高

1***定量——无需依赖标准曲线

2采用微滴式技术高达100,000个的微滴

3线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一

 

三、可分析复杂混合物

1、准确度不完全依赖于扩增效率

2双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法

3支持多重数字PCR

 

四、操作简单,使用方便

1全封闭防污染设计,一键式自动化操作。

2可选全中文分析软件 国内拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪。

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数字PCR采用的策略概括起来非常简单,就是“分而治之”(divide and conquer)[1],这种做法非常类似于计算机科学中的“分治算法”,将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中,在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ,实现“单分子模板PCR扩增”,扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。在实际的数字PCR实验中,事实上是通过呈现两种信号类型的反应器比例和数目进行统计学分析,计算出原始样本中的模板拷贝数。 
单次微滴生成*需2分钟。广州国产数字PCR报价

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定量PCR和数字PCR的特点:


5. 目前定量PCR已经能实现高通量样品条件下的自动化操作。   
6. 数字PCR在单分子层面上的***定量,可以彻底摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数,提高了实验结果在批内和批间的稳定性,甚至能用来对标准品进行定标。   
7. 基于***定量的方式,数字PCR结果的高重复性和高精度可实现微小差异的基因表达分析,如等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、microRNA表达分析等等。所谓“微小差异”的标准一般而言是指表达水平的差异在2倍以内。   
8. 同等条件下,数字PCR在灵敏度方面拥有优势,使得该技术已成为**的液态活检、病原微生物检测、转基因成分测定、宿主残留DNA分析等的热门技术。
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数字PCR(dPCR)是近年来引起重视并迅速发展起来的一种突破性的核酸定量分析技术。该技术先将核酸模板进行稀释,分配到大量 的反应单元中,使每个反应单元中只有单个模板分子,然后进行PCR扩增反应,扩增结束后对每个反应室的荧光信号进行统计学分析,来定量DNA拷贝数。数字PCR采用先扩增后定量,因此不依赖扩增曲线的循环阈值(Ct),也无需采用内参基因和标准曲线,准确度高、重现性好,可以实现***定量分析。由于其独特的技术优势,已经在临床诊断、转基因成分定量、单细胞基因表达分析、环境微生物检测和下一代测序等研究领域显示出巨大的优势和应用前景。数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,让您满意,...

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