7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 上海超滤浓缩管代理销售电话多少?南京默克超滤浓缩管联系方式
脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心,总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做:加入1.5 mL用于置换的缓冲液,1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
4. 加入1.5 mL样品,4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液,4,000×g离心15 min,换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时,可以适当延长离心时间,也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
查看详细信息。 嘉定区默克0.5ml超滤浓缩管咨询报价超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。
外泌小体(Exosome)是一种囊泡结构,直径通常在30-150nm,常见于正常体液和病理样本,培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体,其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流,影响和调控着多方面的生理功能,包括**的发生、免疫促进、凋亡调控、血管的生成、炎症的反应及发育和分化等。由于在体液中出现,外泌小体对于临床生物标志物检测来说特别有利,成为体外诊断、biomarker研究的新热点。
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(达 **分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。 益启生物公司的 超滤浓缩管系列有很多。
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 超滤浓缩管哪家比较靠谱?上海离心浓缩管商家
根据您的具体需求选择不同的 超滤浓缩管设计。南京默克超滤浓缩管联系方式
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计
一经推出即成为生物样品操作的行业**产品。不论是蛋白、
核酸、***或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品,
Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准
化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻
松。
Amicon® Ultra 超滤管的独特优点:
有效浓缩同时保证比较高的蛋白回收率
合理的死体积设计
•避免样品离干而降低回收率
•便于估计和控制样品浓缩倍数
•重复性好,便于样品数据相互比较 南京默克超滤浓缩管联系方式
上海益启生物科技有限公司位于漕宝路400号明申商务广场907、908。公司自成立以来,以质量为发展,让匠心弥散在每个细节,公司旗下试剂,耗材,科研试剂,仪器设备深受客户的喜爱。公司秉持诚信为本的经营理念,在化工深耕多年,以技术为先导,以自主产品为重点,发挥人才优势,打造化工良好品牌。益启生物立足于全国市场,依托强大的研发实力,融合前沿的技术理念,飞快响应客户的变化需求。