脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心，总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。
4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
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近年来随着分离纯化技术的提高，关于外泌小体的研究成果颇丰；这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索，已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求，以及起始样品的规模、数量，可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒，对操作人员也没有特别的经验要求，超滤法后来居上，成为实验室中制备外泌体的通用方法。松江区默克15ml超滤浓缩管商家Millipore超滤浓缩管用于蛋白超滤、浓缩、除盐！
Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作
6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。
抗体标记
适合25-200μg样品操作
5次低速离心，总耗时~50分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 加入抗体样品
• 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL）
- 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。
- 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。
• 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL）
- 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。
- 将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。
3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。
4. 4,000×g离心15 min。
5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。
6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。
7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。
8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 超滤浓缩管零售多少钱呢？
样品的澄清、过滤和除菌
Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管
Ultrafree®-MC（0.5mL）和Ultrafree®-CL（2mL）是一次性使用的微滤离心管，可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好，是蛋白和核酸样品处理的理想选择。
特点与优点
有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择
采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜
提供无菌包装和非无菌包装形式产品
过滤速度快，数据稳定、重现性好
上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)
配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用
顶盖颜色标识易于区分膜孔径 上海超滤浓缩管供应商。松江区默克15ml超滤浓缩管商家
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Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而精细，蛋白吸附损失基本上大概小。
如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？
按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。
Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的，但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。
Amicon® Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。
不保证超滤管不包含RNA酶，建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。 杨浦区Merck离心浓缩管商家
上海益启生物科技有限公司致力于化工，是一家贸易型公司。益启生物致力于为客户提供良好的试剂，耗材，科研试剂，仪器设备，一切以用户需求为中心，深受广大客户的欢迎。公司将不断增强企业重点竞争力，努力学习行业知识，遵守行业规范，植根于化工行业的发展。益启生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念，全力打造公司的重点竞争力。
