外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体：300μg样品（相当于300μg总蛋白）用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释，与protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上（以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰），请参考默克磁珠操作说明书。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推荐使用试剂目录号信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。
默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准，相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心，用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题，真是惠而不费，不亦乐乎？ 超滤浓缩管的主要优势是什么。嘉定区默克4ml超滤浓缩管销售
抗体标记
适合25-200μg样品操作
5次低速离心，总耗时~50分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 加入抗体样品
• 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL）
- 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。
- 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。
• 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL）
- 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。
- 将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。
3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。
4. 4,000×g离心15 min。
5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。
6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。
7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。
8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 青浦区默克15ml超滤浓缩管联系方式您知道益启生物公司的 超滤浓缩管系列都有哪些吗？
Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而精细，蛋白吸附损失基本上大概小。
如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？
按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。
Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的，但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。
Amicon® Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。
不保证超滤管不包含RNA酶，建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。
这是一种只用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。
为了与下游应用兼容，常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长，多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活，而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新，只需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。
Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准
操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果，数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改
善，默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体，减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差，使蛋白样品的处理更加标准化，数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。 超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢？
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度（达 **分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时，向超滤装置中导入气压，大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内，水及小于超滤膜截留分子量的溶质（如盐分）会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀，比离心超滤温和，对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用，更为经济。 超滤浓缩管的优点有很多。普陀区默克离心浓缩管
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浓度：当需要截留的样品浓度很低时，通量通常不受浓度影响。操作过
程中，随着溶质浓度的升高，增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
温度：粗体，作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可
以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。
实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。
pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI
值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。
污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会
在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。 嘉定区默克4ml超滤浓缩管销售
上海益启生物科技有限公司总部位于漕宝路400号明申商务广场907、908，是一家 从事生物科技（除生物试剂）领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让；室内外装潢；建筑工程设计与施工；展览展示服务；计算机及配件、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品）实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。的公司。益启生物拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队，以高度的专注和执着为客户提供试剂，耗材，科研试剂，仪器设备。益启生物致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心，为用户带来良好体验。益启生物始终关注化工市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。
