Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作
6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 超滤浓缩管的优势您了解多少呢？虹口区默克0.5ml超滤浓缩管一级代理
蛋白亲和纯化（无需换液和浓缩）
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
3次低速离心，总耗时~75分钟（含60分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂（沉降的柱床体积）和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。（柱床）树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。
2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*，其间可温和搅动促进结合。 虹口区默克0.5ml超滤浓缩管一级代理根据您的具体需求选择不同的 超滤浓缩管设计。
脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心，总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。
4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
查看详细信息。
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）如果目的样本也不在滤过液中，那么：
a）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您知道吗？
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。 上海Millipore超滤浓缩管授权代理商！Millipore超滤浓缩管参数
超滤浓缩管应用领域你知道吗。虹口区默克0.5ml超滤浓缩管一级代理
特点与优点
温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性
所有型号都可以高压灭菌
提供 3 种规格共选择，用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品
浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速
应用：
大分子（如蛋白、酶、抗体和***）溶液的浓缩和缓冲液置换
渗滤（Diafiltration）模式
非连续渗滤是换液的一种操作方法，即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积，并多次重复这个操作，直到溶液中的盐或溶剂被
去除或降到需要的浓度。而连续渗滤（保持恒定体积）是将超滤杯经转换装置（目录号6003）与补液杯（目录号6028）连接，
使供气压和液体流转。连接有转换装置时，不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换，将两种操作模式的优点
集中在一起，有利于敏感的（蛋白）样品在**恒定、温和的条件下高效换液。 虹口区默克0.5ml超滤浓缩管一级代理
上海益启生物科技有限公司致力于化工，是一家贸易型公司。益启生物致力于为客户提供良好的试剂，耗材，科研试剂，仪器设备，一切以用户需求为中心，深受广大客户的欢迎。公司注重以质量为中心，以服务为理念，秉持诚信为本的理念，打造化工良好品牌。在社会各界的鼎力支持下，持续创新，不断铸造***服务体验，为客户成功提供坚实有力的支持。
