每种PCR方法对比如下:
|
数字PCR |
实时荧光定量PCR |
传统PCR |
|
|
概述 |
测量阴性平行样的比例以确定***拷贝数 |
在发生PCR扩增时进行测量 |
在PCR循环结束时测量积聚的PCR产物的量 |
|
是否定量 |
是,阴性PCR反应的比例适合泊松统计算法 |
是,因为在PCR的指数期内采集数据,在此期间PCR产物的数量与核酸模板量成正比 |
否,但是比较凝胶上的扩增条带的强度与已知浓度的标准品可进行半定量 |
|
应用 |
***载体***定量 核酸标准品***定量 下一代测序文库***定量 稀有等位基因检测 基因表达***定量 混合物富集和分类 |
基因表达定量 质量控制和检测验证 病原体检测 SNP基因分型 拷贝数变异 microRNA分析 ***定量 siRNA/RNAi实验 |
DNA扩增 基因分型 分子克隆 正压生成油包水的液滴。南京国产数字PCR正规代理 |

数字PCR检测及分析原理在上世纪90年代就被提出来了,但是无奈受限于当时的技术条件,样本稀释及分配都是靠手工来完成的,受到很多因素的干扰和限制;并且结果分析对于研究者来说也十分枯燥与繁琐,因此在很长一段时间dPCR发展停滞不前。后来由于微流控技术与微纳集成制造工艺的发展解决了dPCR过程中的几个关键技术问题,推动了dPCR的研究与商业化的发展。
目前根据dPCR样本稀释分配的方式,基本可分为三大类,一种是基于大规模集成微流控芯片;第二种是使用微反应室/孔板;第三种是微滴式。但不论是走芯片式还是微滴式,其基本原理都是将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或者微滴当中,每个反应器的核酸模板数少于1或者等于1。经过PCR扩增之后,有一个核酸分子的模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,可以推算出原始溶液的核酸浓度。 苏州流式数字PCR销售电话永诺生物MicroDrop-100微滴式数字PCR仪**行业的10万个微滴数,保证泊松分布所需要的充分的样本量。


MicroDrop-100微滴式数字PCR 应用范围如下:
a. 动植物检验检疫,动物源性分析、极微量病原菌检测定量分析、转基因产品检测;
b. 降低筛查成本、缩短检测周期,适用于T13\T18\T21三体综合征等遗传病的风险评估;适用于zhong瘤早期筛查、分子分型、靶向用药和疗效监测等;适用于传染性疾病的早期诊断和诊疗指导;
c. 可用于DNA甲基化的检测、CRISPR-Cas9基因编辑效率检测等。
d.基因表达差异监测单细胞研究:测序、PCR
e.无创产前筛查:低成本、快速、传染性疾病:HBV、HIV、COVID-19 定量
**行业的10万个微滴数,保证泊松分布所需要的充分的样本量。无锡永诺数字PCR价格
可使用第三方PCR反应液,配备PCR A300(温度范围4°C-98°C,扩增模块温控精度±0.2°C)。南京国产数字PCR正规代理
与常规PCR方法相比,数字PCR有如下优势:
能够***定量:常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线,但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系,条件上会存在差异,另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可进行***定量。
样本需求量低:适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本
灵敏度高:数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应,这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。
高耐受性:由于目的序列被分配到多个**反应体系中,***降低了背景信号和***物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。 南京国产数字PCR正规代理
浚和(上海)仪器有限公司是一家仪器仪表、电气设备、环保设备、机械设备及配件、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)的销售,从事货物及技术的进出口业务,从事电子科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,机械设备的维修。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司,致力于成为客户业务创新、仪器仪表可信赖的合作伙伴。浚和作为仪器仪表、电气设备、环保设备、机械设备及配件、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)的销售,从事货物及技术的进出口业务,从事电子科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,机械设备的维修。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的品牌企业,为客户提供质量的[ "真空泵", "喷雾干燥机", "培养箱", "等离子清洗机" ]。公司坚持以技术创新为发展引擎,以客户满意为动力,目前拥有5~10人专业人员,年营业额达到2000-3000万元。浚和始终关注仪器仪表市场,以敏锐的市场洞察力以准确定位,实现与客户的成长共赢。
数字PCR(dPCR)是近年来引起重视并迅速发展起来的一种突破性的核酸定量分析技术。该技术先将核酸模板进行稀释,分配到大量 的反应单元中,使每个反应单元中只有单个模板分子,然后进行PCR扩增反应,扩增结束后对每个反应室的荧光信号进行统计学分析,来定量DNA拷贝数。数字PCR采用先扩增后定量,因此不依赖扩增曲线的循环阈值(Ct),也无需采用内参基因和标准曲线,准确度高、重现性好,可以实现***定量分析。由于其独特的技术优势,已经在临床诊断、转基因成分定量、单细胞基因表达分析、环境微生物检测和下一代测序等研究领域显示出巨大的优势和应用前景。数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,让您满意,...