包姜氏液体培养基基础(BGA Broth Base)是为培养姜苗根茎共生促生菌而设计的富氮液体培养基,由包头师范学院与姜科作物团队共同优化,故得“包姜”之名。其配方以酪蛋白胨与大豆木瓜酶消化物提供与缓释氨基酸,酵母粉补充B族维生素和微量元素,可溶性淀粉作碳源,既避免葡萄糖过量产酸,又模拟根茎分泌物成分;特别添加0.3% K₂HPO₄与0.2% MgSO₄,缓冲能力强,可中和菌体代谢酸,维持pH 6.8–7.0,满足假单胞菌、芽孢杆菌及稀有放线菌的同步增殖。实际应用中,1 L培养基接种5 mL姜块研磨液,28℃、160 r/min振荡培养24 h,菌浓即可达2×10⁹ CFU/mL,菌液呈淡棕、微粘,带新鲜生姜清香;继续补糖发酵可产胞外多糖1.2 g/L,对番茄、辣椒具明显促根活性。若需固体分离,补加1.2%琼脂即得BGA平板,可直观观察菌落形态:有效菌株多呈乳白、边缘波状,48 h后在365 nm紫外下可见蓝绿色荧光,与16S rDNA序列联用,可在72 h内完成“功能—种属”双重鉴定。质量控制上,BGA培养基需用去离子水配制,高压灭菌后若出现轻微沉淀,为镁—磷复合物,50℃水浴摇匀即可;储存过程若液体变黄,提示淀粉水解过度,应废弃。其芽孢可耐沸水煮15分钟、紫外照射两小时,喷雾干燥存活率超过90%,为大规模制剂化提供了便利。帕勒隆尼氏假单胞菌
花园芽孢杆菌(Bacillus horti)更早从花园腐殖土中分离,因而得名。菌落奶白、边缘整齐,杆状细胞具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐碱、耐盐、耐干燥,在pH 6–9、15–45℃范围内生长良好,是典型“环境通吃型”根际益生菌。一、防病降毒花园芽孢杆菌能分泌表面活性素、fengycin等环脂肽,破坏病原膜结构,对立枯丝核菌、番茄青枯拉尔氏菌抑菌带宽达26mm;同时产生芳基酰胺酶,降莠定、甲磺隆等碱性除草剂,土壤残留量7d内下降60%,为连作障碍田“”。二、促生提质菌株IAA产量25mg/L,溶磷3.2mg/L,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导黄瓜、生菜根系增30%,叶绿素提高2SPAD单位;大棚试验显示,亩施200g菌粉可使番茄Vc增加12%,糖酸比更协调,货架期延长4d。三、工业酶潜力其耐碱纤维素酶更适pH9、50℃,在洗衣液中仍保持80%活性,可替代化学去渍剂;低温淀粉酶10℃下活力保留70%,为寒区洗碗粉节约能耗20%。四、未来展望借助合成生物学,将花园芽孢杆菌的降毒、促生、耐冷模块植入枯草底盘,可构建“一菌多效”工程菌,用于碱要害田、寒地蔬菜基地及城市绿化基质,让花园芽孢杆菌从“花园”走向更广阔的大地。土壤溶杆菌耐热芽孢芽孢杆菌可耐受55 ℃、高盐环境,利用原油为碳源,产生生物表面活性剂,提高采收率5–8%。

深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)是芽孢杆菌属的“暗色特种兵”。菌落呈棕褐至近黑色、表面光滑有蜡光,革兰氏阳性,杆状细胞可形成椭圆芽孢,耐干燥、耐紫外、耐碱,更适30–37 ℃,pH 6–9,广分布于土壤、海洋沉积物和植物根际。一、生物防治菌株分泌atrophaein脂肽与几丁质酶,对番茄青枯、辣椒疫霉、小麦纹枯抑菌带宽达26 mm;温室试验亩施200 g菌粉,黄瓜枯萎病指下降45 %,农药用量减少三分之一。二、促生抗逆深褐芽孢杆菌产IAA 20 mg·L⁻¹,溶磷3.2 mg·L⁻¹,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导玉米侧根增30 %,吸钾量提22 %;干旱胁迫下,小麦叶片相对含水量提高8 %,产量增10 %。三、工业酶宝库其耐碱蛋白酶在pH 10、50 ℃仍保持85 %活性,已用于无磷洗涤剂,血渍去污力提升30 %;耐热淀粉酶90 ℃半衰期2 h,为纺织退浆省去中和环节,节能15 %。四、抗辐射模型因芽孢含高比例吡啶二羧酸钙,对紫外、γ射线具有极强抵抗力,被ESA选为“火星模拟灭菌”指示菌,用于检测航天器表面消毒效果。未来,借助合成生物学,把深褐芽孢杆菌的抑菌、产酶、抗辐射模块植入枯草底盘,可构建“一菌多用”细胞工厂,为绿色农业、清洁洗涤和太空灭菌提供可持续的微生物钥匙。
肉汤培养基(测磷细菌菌数)是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子;磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙,经球磨过300目,悬于蒸馏水中呈乳白混悬液;pH调至7.0±0.2,分装试管后121℃灭菌15 min,冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂,培养基既保持肉汤的高营养促生优势,又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”,可同步完成溶磷功能验证和菌数测定,适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数(MPN)法:将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释,各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管,每稀释度3重复,28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解,培养液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴随菌膜形成;非溶磷菌虽可增殖,但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管,查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数,全程只需3天,比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋混匀;若肉汤本身含磷(牛肉膏批次差异),可先用磷钼蓝法测可溶磷,超过5 mg L⁻¹即弃用。侄子根瘤菌是土壤里的微型氮厂,直径不过微米,却能把天空搬上餐桌。

耐盐魏斯氏菌(Weissella spp.)是一类革兰氏阳性、兼性厌氧的乳酸菌,广存在于酱油、泡菜、奶酪等高盐发酵食品中。该菌属成员如融合魏斯氏菌(W. confusa)、食窦魏斯氏菌(W. cibaria)和类肠膜魏斯氏菌(W. paramesenteroides)均表现出优异的耐盐性能,能在18% NaCl的高盐环境中保持活性,其中W. paramesenteroides的耐盐性和低温生长能力尤为突出,成为酱醪发酵中的优势菌种。耐盐魏斯氏菌不仅能适应高渗透压环境,还能通过合成胞外多糖(EPS)、有机酸和细菌素等代谢产物,赋予发酵食品独特的风味和质地。例如,W. confusa的EPS产量可达3.34 g/L,明显改善产品的乳化性和口感;W. cibaria在泡菜发酵前期可迅速提升乳酸和乙酸含量,增强产品醇香风味。此外,部分菌株还具备抑菌、抗氧化和降胆固醇等益生特性,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等病原菌有抑制作用,并能降解甘油三酯和胆固醇,展现出开发为功能性益生菌的潜力。综上所述,耐盐魏斯氏菌凭借其高盐适应性、代谢多样性和益生功能,在传统发酵食品和现代功能性食品开发中均具有广阔的应用前景。该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶,在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。土壤短芽胞杆菌
基因组G+C含量37%,携带多重外排泵与渗透调节基因,可在干旱、盐碱环境中维持胞内水平衡。帕勒隆尼氏假单胞菌
谲诈明串珠菌(Leuconostoc fallax)是明串珠菌属中“貌善心狠”的。菌落乳白、表面光滑,细胞球形成对,发酵葡萄糖产酸产气,看似温顺,却能在泡菜前期迅速增殖,借“糖衣”胞外多糖包裹自己,欺骗宿主免疫系统,故得“谲诈”之名。基因组分析揭示,它携带一套罕见的寡肽转运与组氨酸激酶双组分系统,可感知渗透压与酸度变化,一旦环境pH降至4.0以下,便启动“式”产酸爆发,短时间内释放大量乳酸与乙酸,排挤同坛的乳酸菌盟友,独占发酵主导权。更“狡黠”的是,该菌能分泌一种细菌素Fallaxin,对李斯特菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性食源性致病菌具有窄谱杀伤,却对自身及泡菜关键菌株无害,借此在微生态博弈中“借刀杀人”。然而,其高活性胞外多糖合成酶在低温(4℃)仍持续表达,导致泡菜后熟期口感发黏,被食品工程师视为“品质陷阱”。研究尝试通过CRISPR敲除其负调控基因rex,使谲诈明串珠菌在pH 3.8即自动休眠,既保留抑菌特长,又避免过度产黏,为精细控制传统发酵蔬菜的微生态提供了一把“基因开关”。帕勒隆尼氏假单胞菌