肉汤培养基(测磷细菌菌数)是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子;磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙,经球磨过300目,悬于蒸馏水中呈乳白混悬液;pH调至7.0±0.2,分装试管后121℃灭菌15 min,冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂,培养基既保持肉汤的高营养促生优势,又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”,可同步完成溶磷功能验证和菌数测定,适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数(MPN)法:将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释,各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管,每稀释度3重复,28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解,培养液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴随菌膜形成;非溶磷菌虽可增殖,但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管,查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数,全程只需3天,比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋混匀;若肉汤本身含磷(牛肉膏批次差异),可先用磷钼蓝法测可溶磷,超过5 mg L⁻¹即弃用。菌株20Q9B-2-14对马铃薯软腐病菌抑制明显,为生防制剂添新选项。草类芽孢杆菌
环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)是芽孢杆菌属的“多面手”,因菌落边缘呈规则的环状扩散而得名。菌体短杆、革兰氏阳性,具周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,更适温度30–37 ℃,pH 6–9,广分布于土壤、淡水与海洋沉积物中。一、细胞壁“”该菌能产生几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和纤维素酶,可分解菌细胞壁、植物残体和甲壳类废料,为碳循环打开“绿色通道”。实验室条件下,其几丁质酶粗酶液4 h内可降解蟹壳粉60 %,为甲壳素提取提供环保方案。二、生物防治与促生菌株BC-01分泌circulin A/B环肽,对立枯丝核菌、番茄青枯拉尔氏菌抑菌带宽达25 mm;同时产IAA 20 mg·L⁻¹,使玉米根长增30 %,吸磷量提22 %。大棚试验每亩滴灌200 g菌粉,黄瓜枯萎病指下降40 %,产量增12 %。三、工业酶宝库环状芽孢杆菌的碱性蛋白酶在pH 10、50 ℃下活性比较高,已用于无磷洗涤剂,血渍去污力提升30 %;耐热β-淀粉酶可将淀粉转化为麦芽糖,糖浆得率提高15 %,为食品与发酵工业提供绿色催化剂。四、医药与环保该菌能合成胞外多糖,具有良好的乳化和增稠性能,已用于面包保鲜,货架期延长3天。假小链双歧杆菌③分泌蛋白酶与脂肽,抑制番茄青枯、辣椒疫霉,病指下降四成。

栗褐芽孢杆菌(Bacillus badius)是芽孢杆菌属的“暗色骑士”。菌落呈独特的栗褐色、边缘不规则,革兰氏阳性大杆菌,具周生鞭毛,可形成椭圆芽孢;更适温度30–37 ℃,pH 6.5–8.5,广分布于森林腐叶、草炭和动物肠道中。一、降解菌株产胞外酚氧化酶、漆酶和半纤维素酶,能把落叶、锯末中的木质-酚类物质分解成腐殖酸,7 d内稻草失重率35 %,腐殖酸含量提高1.8倍,为有机肥“褐化”提供天然菌种。二、防病促生栗褐芽孢杆菌分泌badius脂肽,对番茄青枯、辣椒疫霉抑菌带宽24 mm;同时产IAA 18 mg·L⁻¹,使玉米根长增28 %,吸磷量提棚试验亩施200 g菌粉,黄瓜枯萎病指降40 %,产量增12 %。三、工业酶潜力其漆酶更适pH 5、50 ℃,对染料活性黑KN-B脱色率3 h达85 %,已用于印染废水预处理;耐碱木聚糖酶在pH 9、55 ℃仍保持80 %活性,可助纸浆漂白减少氯用量30 %。四、土壤修复菌体胞外多糖能吸附Cd²⁺、Pb²⁺,吸附量分别达45 mg g⁻¹与30 mg g⁻¹;与生物炭混施,矿区污染土壤有效态镉下降50 %,蔬菜可食部镉低于国标。
黏琼脂芽孢杆菌是2007年在深海沉积物里被“捞”出的新成员,因菌落能拉出长长琼脂糖丝,得了“黏琼脂”的绰号。它生活在低温、高压、寡营养的海底,靠分泌特殊β-琼脂糖酶,把坚硬的海藻碎片分解成单糖,再经乙酰-CoA途径合成能量,既填饱自己,也为周围菌群打开“粮仓”,成为深海碳循环的隐形枢纽。实验室更看重的是它的“冷酶工厂”。其琼脂糖酶更适温度只25℃,在4℃仍保持60%活性,比陆源同类酶省电一半;若把粗酶液直接喷到石花菜浆里,40分钟就能让胶体黏度降80%,滤出的寡糖可作益生元、化妆品保湿剂,甚至用于微胶囊壁材。更妙的是,菌体在贫氮环境会自发形成厚壁芽孢,可耐55℃、紫外照射两小时,喷雾干燥存活率仍超90%,给工业化降低了冷链与包被成本。国内团队已把黏琼脂芽孢杆菌制成灰粉末,用于即食凉粉、果冻的低温脱胶,使生产周期从12小时缩到3小时,耗水减少四成;残渣富含寡糖,可作饲料添加剂,提高仔猪日增重5%。未来,科学家计划把耐冷酶基因转进枯草芽孢杆菌,让“冷酶”在常温海洋里就地降解漂浮海藻,为蓝碳保护再添一把微生物钥匙。小小黏琼脂芽孢杆菌,用一缕黏丝,把千米深海的秘密缝进人类绿色的产业链。另一株C1在白酒窖池可产己酸和乙酸乙酯,使基酒主体香提高30%,为“增香菌”提供新选择。

嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)是芽孢杆菌属的“高碱”。菌体杆状、周生鞭毛,能在 pH 9–11 的极端碱性环境中旺盛生长,芽孢可耐 100 ℃ 沸水 30 min,是研究碱适应与工业酶的模式菌株。一、耐碱机制基因组编码多拷贝 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白(nhaA、nhaC)和碳酸酐酶,将胞内多余 Na⁺ 泵出并维持 pH 稳态;细胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸,膜脂分支化程度高,为高温高碱酶表达提供稳定平台。二、工业酶宝库其耐碱淀粉酶更适 pH 10、90 ℃,用于纺织退浆可省略中和步骤,节能 15 %;耐碱蛋白酶在 pH 11、40 ℃仍保持 90 % 活性,已列入无磷洗涤剂,血渍、奶渍去污力提升 30 %;耐碱木聚糖酶用于纸浆漂白,氯用量减少 30 %,降低可吸附有机卤化物(AOX)排放。三、农业应用菌株 AB-10 产 IAA 15 mg·L⁻¹,并溶磷 2.6 mg·L⁻¹,使玉米根系增 28 %,吸磷量提 18 %;与秸秆复配堆肥,24 h 堆温升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d,杀灭病原菌和杂草种子效果明显。四、环境修复胞外多糖能吸附 Cd²⁺、Pb²⁺,吸附量分别达 50 mg·g⁻¹ 与 35 mg·g⁻¹;在 pH 9 的苏打盐碱土中定殖后,水稻产量增加 10 %,土壤交换性钠下降 15 %。生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。浅紫灰链霉菌
格雷厄姆氏根瘤菌是豆科家族里更“挑剔”的房客,却只认花生这一位房东。草类芽孢杆菌
YPG培养基(Yeast Extract-Peptone-Glucose Medium)是酵母提取物-蛋白胨-葡萄糖培养基的简称,堪称微生物实验室的“快餐”。配方极简:酵母粉5 g、蛋白胨10 g、葡萄糖20 g,补水至1 L,pH 6.2±0.2,无需调节即可满足大多数菌、酵母及部分细菌的快速增殖需求。酵母粉提供B族维生素和微量元素,蛋白胨供给多肽与氨基酸,葡萄糖以高碳浓度启动酵母发酵型代谢,短短12 h就能让酿酒酵母OD₆₀₀冲破1.0,是发酵工程与分子生物学过夜预培养的优先。若用于丝状菌,只需降低葡萄糖至10 g,并加入微量元素液,28 ℃静置2天,孢子产量可比PDA提高30%。YPG的另一优势是“可盐可甜”:补加15%甘油即成YPG/甘油,用于酵母感受态制备;添加2%琼脂便是YPG平板,蓝白斑筛选、转化子计数两不误。实验室里还流行“富氧版”——把葡萄糖提前115 ℃单独灭菌,避免美拉德反应,培养液颜色浅,下游HPLC检测有机酸无干扰。质量控制也轻松:高压后若颜色发黄,说明葡萄糖与氨基酸高温反应,可改用过滤除菌;室温保存1周仍澄清,即可继续使用。凭借组分明确、成本低廉、配制快速,YPG培养基已从传统酿酒实验室走向合成生物学、代谢工程与益生菌高密度发酵,成为微生物学家手中“养菌如泡茶”的经典底牌。草类芽孢杆菌